dlc1在骨髓增生异常综合征中表达及临床意义探讨word格式论文.docxVIP

学位论文独创性声明本人冯大伟声明，所呈交的学位论文系在导师杨林花教授指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已作出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一起工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1．交回学校授予的学位证书;2．学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3．本人按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4．本人负责因论文不实产生的法律纠纷。论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。（保密论文在解密后应仍遵守此规定）论文作者签名：日期：年月日指导老师签名：日期：年月日（本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及个人不得擅自使用）前言骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsyndromes,MDS）是一组异质性、获得性干细胞和(或)祖细胞的克隆性疾病，其主要特征为无效造血所致的难治性血细胞减少、骨髓中1～3系病态造血、极易发展为急性白血病。MDS发病机制复杂，国内外研究发现肿瘤抑制基因活性的丧失导致疾病的进展与MDS发病密切相关。近年研究认为MDS发病机制与细胞免疫异常、造血干细胞增殖与凋亡、染色体异常、造血干细胞异常、肿瘤抑制基因活性的丧失导致疾病的进展等多方面因素有关。其中肿瘤抑制基因活性的丧失导致疾病的进展可能是MDS发病的重要机制之一。近年来随着分子生物学技术的发展，对MDS的研究进一步深入，大量研究显示：抑癌基因在MDS患者中占有重要作用，参与疾病的发病机制以及疾病进展。新近研究发现抑癌基因甲基化影响基因异常表达，过度甲基化会造成该基因表达降低或缺失，如P15基因和FHIT基因[1,2]。研究显示，MDS患者中一些抑癌基因启动子区5′-CpG岛的高甲基化是这些基因失活主要机理[3]。国际预后积分系统评分标准IPSS根据外周血各系血细胞减少程度、骨髓原始细胞百分比及细胞遗传学分析。评分标准是：(1) 血细胞减少：血红蛋白100g/L,中性粒细胞计数1.5×109/L,血小板计数100×109/L；血常规三系均无减低或仅一系减少评分为0分；二系或三系减少为0.5 分。(2) 细胞遗传学异常分为三级：正常核型、del(5q) 、del(20q) 、-Y评分为0；复杂异常或累及7号染色体异常评分为1.0；其余异常为0.5。(3)骨髓中原始细胞数分4级：0.05评分为0，0.05～0.10评分为0.5，0.11～0.20评分为1.5，0.21～0.29评分为2.0。根据IPSS评分标准,将MDS患者分为4组：低危组为0分, 中危1组为0.5～1.0分,中危2组为1.5～2.0分,高危组≥2.5分[4]。本研究收集MDS患者血常规、骨髓象、染色体、融合基因等相关临床资料，将MDS患者根据IPSS积分标准及危度划分进行分组，分为高、中、低危三组。按WHO分类诊断标准[5]，将MDS患者分为RA、RCMD、RAEB-1、RAEB-2四组。DLC-1 是一种肿瘤抑制基因，位于人类染色体8p21.3-22，人类正常组织中都有表达，心脏与肺脏组织中表达量最高。DLC-1 基因失活使Rho 蛋白过度表达，向细胞内持续传递生长信号，改变细胞生物学功能，包括细胞骨架的形成、细胞黏附性以及细胞周期等[6]。DurkinME等[6-9]研究认为DLC-1作为抑癌基因，具有抑制细胞增殖和抗肿瘤作用。DLC-1基因在人类许多肿瘤中常呈低表达或表达缺失。有报道[6-9]，肝癌、乳癌、结直肠癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌、鼻咽癌等许多常见肿瘤中均出现DLC-1 低表达或表达缺失，其在MM细胞株、AML 患者中也呈低表达。进一步研究显示杂合型缺失、纯合型缺失、CPG 岛甲基化、点突变可能是导致DLC-1 基因异常表达的主要原因。随着表观遗传学研究的深入，发现抑癌基因启动子区的甲基化是抑癌基因失活的主要机制之一。研究表明，DLC-1 基因作为新的抑癌基因，其启动子区域高甲基化可导致其在多种实体瘤中的表达沉默。那么，DLC-1 作为抑癌基因是否在MDS患者中表达异常，是本课题的主要研究内容。本研究收集MDS患者30例和正常对照标本10例，通过实时荧光定量P