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第三章 液相色谱检测器 3.1紫外-可见光（UV-VIS）检测器 3.2示差折光检测器（differential refractometers, RI） 3.3荧光检测器（fluorescence detector） 3.4电导检测器（conductivity detector, CD） 3.5 蒸发光散射检测器（evaporative light-scattering detector, ELSD）紫外-可见光（UV-VIS）检测器 * 检测器： 用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的组成和含量变化的装置。 检测器利用溶质的某一物理或化学性质与流动相有差异的原理，当溶质从色谱柱流出时，会导致流动相背景值发生变化，从而在色谱图上以色谱峰的形式记录下来。 ?? 要求：灵敏度高、响应快、重现性好、线性范围宽、适用范围广、死体积小、对流动相流量和温度波动不敏感等 ?? 通用型检测器: ?? 示差折光检测器、蒸发光散射检测器 ?? 专属型检测器: ?? 紫外检测器、荧光检测器、安培检测器 表1 HPLC中常见检测器的基本特性 3.1紫外检测器 原理： 基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。 很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器 用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏度，常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长，但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长，另外，应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。 固定波长检测器 可变波长检测器 ?? 氘灯为光源 ?? 波长可任意选择，采用样品最大吸收波长为检测波长，可增加灵敏度 ?? 光电二极管阵列检测器 ?? 多通道检测器 ?? 每一个二极管相当于一个单色仪的出口狭缝, 可获得三维光谱－色谱图 二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）： 以光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的UV-VIS检测器（图2）。它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。与普通UV-VIS检测器不同的是，普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入流动池。而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检测。 1. 直接紫外检测： 所使用的流动相为在检测波长下无紫外吸收的溶剂，检测器直接测定被测组分的紫外吸收强度。多数情况下采用直接紫外检测。　2. 间接紫外检测： 使用具有紫外吸收的溶液作流动相，间接检测无紫外吸收的组分。在离子色谱中使用较多，如以具有紫外吸收的邻苯二甲酸氢钾溶液作阴离子分离的流动相，当无紫外吸收的无机阴离子被洗脱到流动相中时，会使流动相的紫外吸收减小。　3. 柱后衍生化光度检测： 对于那些可以与显色剂反应生成有色配合物的组分（过渡金属离子、氨基酸等），可以在组分从色谱柱中洗脱出来之后与合适的显色剂反应，在可见光区检测生成的有色配合物。 ?3.2 示差折光检测器（differential refractometers, RI） 1利用组分和流动相的折射率之差，进行检测。 2. 在适当的条件下对所有的溶质都有响应，应用范围宽。 3. 对温度和流速很敏感，灵敏度较低，不适用于梯度洗脱。 　RI 检测器根据其设计原理可分为反射型（根据Fresnel定律）、折射型（根据Snell定律）和干涉型三种类型。 3.3荧光检测器 　原理： 许多有机化合物，特别是芳香族化合物、生化物质，如有机胺、维生素、激素、酶等，被一定强度和波长的紫外光照射后，发射出较激发光波长要长的荧光。荧光强度与激发光强度、量子效率和样品浓度成正比。有的有机化合物虽然本身不产生荧光，但可以与发荧光物质反应衍生化后检测。结构： 如图 特点： 有非常高的灵敏度和良好的选择性，灵敏度要比紫外检测法高2-3个数量级。而且所需样品量很小，特别适合于药物和生物化学样品的分析。 3.4电导检测器（conductivity detector, CD） 原理： 基于离子性物质的溶液具有导电性，其电导率与离子的性质和浓度相关。 电导检测器是离子色谱中必备的检测器。　　电导检测器的构成： 由电导池、测量电导率所