dysferlin肌病mirna表达模式的改变及mir708在成肌细胞生长中的作用word格式论文.docx

目录英汉缩略名词对照表………………………………………….….….……1 中文摘要…………………………………………………………………...3 英文摘要………………………………………………………...…………6 前言…………………………………………………………..………...…..8 材料和方法……………………………………………………………….10 结果……………………………………………………….………………24 讨论……………………………………………...…………….………….35 全文小结……………………………………………………………….…38 参考文献………………………………………………….………………39 综述……………………………………………………………………….43 致谢……………………………………….……………….……….…..…53英汉缩略名词对照表（按英文字母顺序排列）英文缩写英文全称中文全称Acr-BisAcrylamide-bisacrylamide丙烯酰胺-双丙烯酰胺APAmmonium peroxydisulfate过硫酸铵BCABicinchoninic acid二喹林甲酸CDNAComplementary DNA互补 DNACCK-8Cell counting kit-8细胞计数试剂盒dDay天DMDDuchnne muscular dystrophy杜氏肌营养不良DEPCDiethyl pyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMEMDulbecco’s Modified Eagle MediumDMEM 培养液DMSODimethyl sulfoxide二甲基亚砜DYSFDysferlinDysferlin 蛋白编码基因FBSFetal bovine serum胎牛血清GAPDHGlyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase3-磷酸甘油醛脱氢酶Hmgb3high mobility group box 3高迁移率族蛋白 b3KDkDa千道尔顿MDMuscular dystrophy肌营养不良miRMicroRNA微小 RNAMYODMyogenicdifferention肌源性分化因子MYOGMyogenin肌细胞生成素MHCMuscle heavy chain肌球蛋白重链ODOptical density光密度PAGEPolyAcrylamide Gel Electrophoresis聚丙烯凝胶电泳PCRPloymerase chain reaction多聚酶链反应PMSFPhenylmethanesulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟PVDFPolytetrafluoroethene聚偏二氟乙烯RT-PCRReverse transcriptase PCR反转录 PCRRISCRNA-induced siliencing complexRNA 诱导的沉默复合物rpmRound per minute每分钟转速SDSSodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠TBSTris-Buffered SalineTris-HCL 缓冲盐溶液TBSTTris-Buffered Saline Tween-20含吐温-20 的 TBSTEMEDN,N,N,N-Tetramethylethylenediamine四甲基乙二胺TrisTris(hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷UTRUntranslated Regions非翻译区Dysferlin 肌病 miRNA 表达模式的改变及 miR-708 在成肌细胞生长中的作用 中文摘要【目的】系统检测 miRNA 在 Dysferlin 肌病中的表达，初步探讨 miRNA 与 Dysferlin 肌病的关系；结合靶基因预测及细胞学实验，探讨 miR-708 mimic 对成肌细胞的 影响。【方法】1.结合临床表现、HE 染色和肌酶特殊染色、免疫组化等方法，筛选 Dysferlin 肌 病病例为实验组，非特异性改变肌组织为对照组，取部分组织行 miRNA 芯片 分析。2.靶基因预测网站预测作用于 DYSF 基因的 miRNA，结合 miRNA 芯片结果，选 择与 dysferlin 肌病关系密切的 miRNA，Taqman 探针实时定量 PCR(RT-PCR) 检测其在人肌肉组织及小鼠成肌细胞 C2C12 增殖和分化过程中的表达。3.合成 miR-708 mimic，转染成肌细胞 C2C12，光学显微镜下观察成肌细胞生长 分化情况，利用 CCK-8 检测 miR-708 mimic 对 C2C12 细胞生长增殖的影响， 用流式细胞术检测转染 miR-708 mimic 后的增殖期 C2C