egffoxm1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究word格式论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 学位论文使用授权声明 本人主:企 7解苏J+I人学关于收集、保存和使用学作论文的规 定， 即:7:f贯HR ju:著作，直归 属/Ij.1li.大学.本学位论文 电子文抖的内容加纸 IE论文的内容相-í主.苏州大 7·有权l甸回运罔斗害怕 、早日11非Ir.;;;支献 信息情报， 1心、， l同lr;学笼术馆也研FL货t 含万岁钦岳吃子f」..饭号川、 中国守本期刊 {光很1际〉电子杂志社;:交;;;c学位 义的复印行肩l电子 且梢，允讷论交被代[划和 If侧.1州以采用直在司l、结自或具ff!复在手段 仅在事l汇编y佼论文，可以将学位论艾的企哥哥 3或部分内容$商人有 关数 据浮进行抢索. i步棺论文。 本学f.n世义思 · 在-一年_JJ 解 后适用本现定. .W.涉!论文Ii i论e以以义义frl 导师签筑札E 比笠也丘ιltl 纱蚁t 占土旦IT.吁2! EGF EGF/FOXM1 在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究 中文摘要 PAGE PAGE IV I I EGF/FOXM1 在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究 中文摘要 研究目的：卵巢癌的发生伴随着各种基因通路的相互作用，研究这些基因的功能 有助于癌症的基因靶向治疗。EGF、FOXM1 基因均提示可能参与卵巢癌的发生与恶 性进展，本课题通过临床标本及体外实验研究 EGF/FOXM1 在卵巢癌细胞增殖、转移 中的作用及作用机制。 方法：采用免疫组化 SP 法对临床上收集的卵巢癌组织标本和正常的卵巢组织标 本检测 FOXM1 的表达情况；利用 Western blot 技术分析人卵巢癌细胞 HO8910PM、 OVCAR3、SKOV3 等细胞中 FOXM1 的表达情况；不同浓度 EGF 作用于 SKOV3 细 胞后用 Western blot 法检测 FOXM1 的表达情况；cck8 法检测不同浓度 EGF 对 SKOV3 细胞的增值影响；Transwell 小室法检测不同浓度 EGF 对 SKOV3 细胞的迁移、侵袭 影 响 ； 设 计 合 成 三 种 靶 向 人 FOXM1 基 因 的 siRNA 表 达 序 列 ， 应 用 脂 质 体 LipofectamineTM2000 共转染至 SKOV3 细胞作用 24h 后提取总蛋白，应用 Western blot 技术分析转染后 SKOV3 细胞 FOXM1 蛋白表达量，选取敲除 FOXM1 效能最佳的 siRNA 序列；cck8 法检测敲除 FOXM1 后添加 EGF 与否对 SKOV3 细胞增殖的影响。 结果：1、卵巢癌组织中 FOXM1 表达显著高于正常卵巢组织，FOXM1 在卵巢 癌 OVCAR3 细胞、SKOV3 细胞、HO8910 细胞中均有明显表达，其中 SKOV3 细 胞表达量高于其他两种细胞；2、SKOV3 细胞经不同浓度【浓度（ng/ml）=0、5、10、 25、50、100】EGF 处理后行 Western blot 法检测提示 EGF 浓度为 10ng/ml 时 FOXM1 的表达量最高（P0.05）；3、SKOV3 细胞经不同浓度【浓度（ng/ml）=0、5、10、 25、50、100】EGF 处理后行 cck8 检测提示 10ng/ml 浓度的细胞吸光度最高（P0.01）； 浓度为 10ng/ml 的 EGF 作用于 SKOV3 细胞作为实验组，不加 EGF 作为对照，Transwell 小室迁移实验 24h 后电镜拍照提示实验组细胞迁移率大于对照组（P=0.002），侵袭实 验 24h 后电镜拍照提示实验组细胞迁移率大于对照组（P=0.015）； 4、三种靶向 FOXM1 的 siRNA 感染 SKOV3 细胞后 Western blot 证实 siRNA-FOXM1-801 的沉默 效果最好；cck8 法检测 siRNA-FOXM1-801 沉默 FOXM1 后能显著抑制 SKOV3 细胞 中文摘要 EGF/FOXM1 在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究 增殖（P=0.005）；cck8 法检测 FOXM1–siRNA-801 沉默 FOXM1 后吸光度提示对照组 （未加 EGF）和实验组（EGF=10ng/ml）统计结果无明显差异（P=0.882）。 结论：FOXM1 基因在卵巢癌组织中过表达，三株卵巢癌细胞株中均有 FOXM1 的过度表达，以 SKOV3 细胞的表达量最高；EGF 浓度为 10ng/ml 时促进 SKOV3 细 胞中 FOXM1 的表达作用最明显以及增强 SKOV3 细胞的增殖、侵袭能力，敲除 FOXM1 基因后 EGF 失去对细胞增殖的影响，从而证明 E