en2在结肠癌中表达及其与增殖凋亡关系word格式论文.docx

Abstracttransfect the siRNA 1 group and the control group, we found the interfering group that proliferation ability was significantly inhibited (P 0.05); Cell apoptosis rate increased significantly (P 0.05).Conclusion:1）EN2 protein is mainly expressed in colon cancer cells cytoplasmic, EN2 is expressed high significantly in colon cancer tissue2）The high expression of EN2 protein is associated with tumor size, degree of infiltration, lymph node metastasis. EN2 positive rate were significantly higher inpatients with lymph node metastasis than those without lymph node metastasis (P 0.05).3）Down-regulated the expression of EN2 significantly inhibit colon cancer cellproliferation, and improve cell apoptosis.Keywords: colon cancer；EN2；siRNA；proliferation and apoptosis目录前言 1第一部分：EN2 蛋白在结肠癌组织中的表达与临床病理特征的关联分析3引言 3材料和方法 31. 材料 31.1 临床标本收集 31.2 试剂 31.3 自配试剂 31.4 主要仪器设备 52. 实验方法 52.1 免疫组化染色 52.3 蛋白免疫印迹反应（Western blot）63. 数据分析及统计方法 7结果 81 EN2 蛋白在结肠癌组织中的表达82 EN2 蛋白在结肠癌中的表达与临床病理特征的关联9讨论 11第二部分：EN2 的表达下调对结肠癌细胞增值凋亡的影响12引言 12材料和方法 121 材料 121.1 细胞系 121.2 主要试剂 121.3 主要仪器设备 131.4 溶液配制 132 实验方法 142.1 细胞培养 14siRNA 的细胞转染 15蛋白免疫印迹反应（Western blot） 152.4 实时荧光定量（RT-PCR） 162.5 MTT 检测细胞增殖 182.6 流式细胞术检测细胞凋亡 183 结果分析 18结果 191 EN2 在结肠癌细胞系中的表达 192 EN2 干扰片段的筛选 203 EN2 的表达下调对结肠癌 SW620、LOVO 细胞增殖的影响 204 EN2 的表达下调对结肠癌细胞凋亡的影响 21讨论 22结论 24致谢 25参考文献 26在学期间参与科研及发表论文情况 29综述 30中英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称CRCcolorectal cancer结肠癌EN2Engrailed 2同源盒基因 EN2HOXhomeobox gene同源异型盒基因Bpbase pair碱基对cDNAcomplement DNA互补 DNACDScoding sequence编码序列DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMFDimethylformamide二甲基甲酰胺DMSOdimethyl sulfoxide二甲基亚砜DNAdeoxyribonucleic acid脱氧核糖核酸EBethidium bromide溴化乙锭ECLenhanced hemiluminescence增强化学发光GAPDHglyceraldehydes3-phosphate dehydrogenase三磷酸甘油醛脱氢酶mRNAmessgener RNA信使 RNAODoptical density光密度PAGEPolyacrylamide Gel Electrophoresis聚丙酰胺凝胶电泳PBSphosphate buffered saline磷酸盐缓冲液PCRpolymerase chain reaction聚合酶链式反应RNaseRibonuclease核糖核酸酶SDSSoculium Dodecyl Sulfate十二烷基磺酸钠TAETris-glacial aceticTris-乙酸－ED