原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
实验二 病毒尿囊液的收获及血凝实验 病毒尿囊液的收获 实验器材：镊子、无菌眼科镊子和剪刀、青霉素瓶、灭菌吸头、移液器、小三角瓶、灭菌高压锅 已接种鸡胚收获尿囊液前置于4℃冰箱4h 或过夜。 将冻存的鸡胚置于蛋托上，用碘酊和酒精棉消毒气室端，用无菌镊子击破气室部卵壳并撕开壳膜，用无菌吸管经绒毛膜进入尿囊腔，吸取尿囊液，置无菌容器中低温保存备用。 血清学诊断 HA+HI 鸡群血清学测定： 临界值/阈值（保护性抗体） 免疫前后无变化 不同疫苗的免疫结果 免疫监测 血凝实验 实验目的：掌握血细胞凝集试验的原理，熟悉血凝试验的方法和结果分析。 实验原理：某些病毒表面的血凝素能与人及哺乳动物红细胞上的血凝素受体结合，引起红细胞凝集，通过观察红细胞凝集来反映病毒的有无和滴度的实验，称为血凝实验。 实验器材：鸡胚尿囊液、0.5%鸡红细胞悬液、生理盐水、移液器、吸头、EP管、离心管、离心机 血凝实验的实验方法 在96孔“U”形微量反应板上进行，自左至右各孔加25ul生理盐水。 于左侧第1孔加25ul病毒收取液，混合均匀后，吸25ul至第2孔，混合均匀后，吸25ul至第3孔，依次倍比稀释，至第11孔，吸弃50ul，稀释后病毒稀释度为第1孔1：2，依次1：4，1：8……。最后一孔为对照。 自左至右依次向各孔加1%鸡红细胞25ul，轻微振荡混匀，使血球与病毒充分混合，在37℃温箱中作用15～30min后，待对照红细胞已沉淀可观察结果。 判定结果：以100%凝集的病毒最大稀释孔为该病毒血凝价，即1个凝集单位，不凝集者红细胞沉于孔底呈点状。 血细胞凝集（HA）试验术式表 结果判定：本病毒的血凝价为1：128，即1：128的0.1ml中含有1个凝集单位。 注意事项：实验用器材必须十分清洁，避免造成假阳性。 思考题： 1、为什么在收获尿囊液前要将鸡胚置于4℃冰箱4h或过夜？ 2、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原抗体反应？ * 推荐程序： 蛋用鸡 一免：7-10日龄，滴鼻、点眼，Clone-30或IV系 二免：间隔15天，22-25日龄，油苗+弱毒苗注射 三免：120日龄左右，油苗+饮水或油苗+弱毒苗注射 60-80日龄及产蛋高峰后（300天左右），做HI检测；若不齐，则饮水或气雾免疫。 肉仔鸡 一免： 一日龄半头份油苗+弱毒苗滴鼻、点眼 二免：10-20日龄饮水 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 红细胞 弃去 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 病毒（ul) 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 生理盐水（ul) 血细胞对照 1：2058 1：1024 1：512 1：256 1：128 1：64 1：32 1：16 1：8 1：4 1：2 病毒稀释度 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 孔号 37℃ 15～30min － － + ++ +++ # # # # # # # 判定结果 *
文档评论（0）