核酸合成生物技术班 生物化学 培训讲解.pptVIP

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核酸合成生物技术班 生物化学 培训讲解.ppt

DNA;第一节 DNA生物合成的一般规律;第一节 DNA生物合成的一般规律;用15N-NH4Cl为唯一碳源连续培养多代;二、复制子、复制起点和方向;第二节 原核生物DNA复制;A;2.大肠杆菌DNA聚合酶;DNA后聚合酶在引物3-端延伸合成新链过程:;PPi;A;A;特 性;二、E.coli DNA复制体及相关蛋白;酶或蛋白质 分子量/103 亚基数 具备功能;1.DNA螺旋酶(helicase);P;冈崎片段(1000-2000nt);酶或蛋白质 分子量/103 亚基数 具备功能;5;第三节 细胞DNA复制的阶段;E.Coli DNA在复制原点形成复制引发体所需的蛋白质或酶;oriC;Ⅱ型DNA拓扑异构酶;三、DNA合成终止过程;四、真核细胞DNA复制;;端粒(telomere)复制:;端粒酶;第五节 DNA损伤后修复简介;CH3;二、碱基切割修复;切口; 希望同学们自习了解 三、核苷酸切割修复 四、直接修复 五、重组修复;紫外线;大肠杆菌 (E.coli)在含有 3H-dTTP的培养液中,定期取样小心分离并观察DNA变化??况,结果如下:;大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的亚基与功能;DNA复制起始必须精确受到调控,因为每个生命周期复制只发生一次。现已知,复制起始的时序受到DNA甲基化和细菌细胞质膜相互作用的影响。E.Coli 的 oriC DNA是由Dam甲基化酶甲基化的,而甲基化发生在回文顺序(5‘)GATC的腺嘌呤N6 (m6A),大肠杆菌的oriC区密布GATC顺序(在245bp的DNA链中含有11个GATC)而在整个E.Coli DNA256bp中只可能出现一个G m6ATC。复制之后,DNA是半甲基化的,即oriC区的母链是甲基化的,而新合成的链没有甲基化。在下次结合DnaA蛋白复制起始前该区的该位点必须被Dam甲基化酶重新甲基化。

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