2011-09-8-受精.pptVIP

受精（fertilization）是卵子和精子融合为一个合子的过程。 获能（sperm capacitation）人及哺乳类精子在雌性生殖道中获得的受精能力。 顶体反应（acrosomal reaction） ：精子获能后，与卵相遇时，精子一接触到卵表面或卵周结构，精子顶体泡即与精子质膜融合，释放出酶和其他蛋白质的反应。有助于精子穿过卵的外围结构和精核入卵。 原核融合（pronuclei fussion ）精细胞的细胞核进入卵细胞质后，包装紧密的染色质开始解旋。精子的细胞核膜解体形成小的囊泡，并立即与精子细胞核脱离，形式没有核被膜的精子染色质，但很快形成新的核被膜，此时称为雄性原核（male pronucleus）。雄性原核向卵细胞的雌性原核（female pronucleus）移动，这种迁移是由精细胞的中心粒产生的微管指导的，精细胞的中心粒是随细胞核一同进入卵细胞的。当两个原核相互接触时，通常会发生融合，形成一个二倍体的核，此即原核融合。 透明带反应（zona reaction）：精子进入卵子后，卵子浅层细胞质内的皮质颗粒立即释放溶酶体酶样物质，使透明带结构发生变化的现象。 受精的意义： ①受精启动了细胞分裂；②精子与卵子的结合，恢复了二倍体核型；③受精决定遗传性别；④受精卵的染色体来自父母双方，生殖细胞成熟分裂时其中的遗传物质重新组合，使新个体具有不同于亲代的变异性。 （六）精卵融合的机制 CD9 和CD81 GPI锚定蛋白-糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI) 整合素-（a2 b1 、a3 b1 、a5 b1 、a6 b1、avb1、avb3、avb5） 2. 精子表面精卵融合相关蛋白 附睾蛋白DE-富含半胱氨酸分泌蛋白(cysteine-rich secretory protein 1, CRISP1)  ADAM 家族-去整合素结构域和金属蛋白酶结构域(adisin-tegrinanda- metalloprotease-domain) ADAM1(又名受精素a), ADAM2(受精素b) 和ADAM3 (cyritestin) calmegin Izumo-跨膜蛋白 其他蛋白质-钙离子通道TRP-3 卵融合是有性生殖中最为关键的事件之一，因此对该过程分子机制的理解具有十分重要意义。已经发现多种蛋白质涉及到这个重要的过程，主要包括卵子表面的CD9、GPI锚定蛋白和整合素等,精子表面的附睾蛋白DE、Izumo和ADAM家族成员等，它们通过特异性的识别和结合而辅助完成了精卵融合。 1. 卵子表面精卵融合相关蛋白 “获能”，“顶体反应”，与“卵融合”是精子具备受精能力的三个要素。三者之一缺如则该精子不能进入卵内，因此在离体检测时，如果一个精子进入了卵内，就可认为该精子能够正常地进行获能、顶体反应和与卵融合，因此该精子也就被认为具有了受精能力。 七、受精的条件 1. 精子和卵子的发育成熟 2. 必须在排卵后12内受精 3. 精子进入女性生殖管道24小时内受精 4. 精子的数量和质量 5 million 5. 生殖器官发育成熟，生殖管道通畅 6. 雌、孕激素 八、受精的结果和意义 1. 新生命的开端 2. 恢复2倍体 3. 遗传与变异 4. 决定了胎儿的性别 2 3 4 1 哺乳动物正常受精前和受精期间所发生的主要事件及其相互关系 获能　Ａ 顶体反应 Ｂ 部分未参加顶体反应的精子头部质膜发生变化 Ｆ 穿过透明带 Ｃ 精卵融合 Ｅ 精核进入卵胞浆 Ｇ 卵膜特征改变 Ｊ 卵膜阻止多精受精 Ｋ 精子核膜消失 Ｈ 激活卵胞浆 Ｌ 皮质颗粒外放 Ｍ 精子核解凝聚 Ｉ 卵减数分裂完成 Ｐ 透明带反应 Ｎ 精原核发育 Ｏ 卵原核发育 Ｑ 细胞骨架系统激活与重排 Ｒ 精卵原核融合 Ｓ 第１次卵裂 Ｔ 精子高度活化 Ｄ 图1哺乳动物正常受精前和受精期间所发生的主要事件及其相互关系 第二节、异种体外受精 （ＨＯＰ试验的原理及应用） 一、什么是ＨＯＰ试验 ⑴ Hamster egg penetration assay (test) ⑵ Zona-free hamster egg assay (test) ⑶ Egg Penetration assay ⑷ Sperm penetration assay 去透明带仓鼠卵-精子穿透试验 Golden hamster 在1976年，yanagimachi完成的人精子穿透无透明带仓鼠卵 金黄地鼠超排卵 精 液 Swim-up提取高活力精子 去除卵丘细胞(0.1%透明质酸酶) 精子