Ⅰ期非小细胞肺癌中p16基因及其产物的表达.docVIP

Ⅰ期非小细胞肺癌中p16基因及其产物的表达 肿瘤 1999年第1期第19卷 短篇报道 作者：包国良　冯久贤　董强刚　江晓丰　沙慧芳　王恩忠 单位：上海市胸科医院胸部肿瘤研究所(上海 200030) 　　P16基因是一个新近发现的抑癌基因，其表达异常被认为与癌细胞的失控性增殖密切相关［1～3］。近年来，关于非小细胞肺癌(NSCLC)中P16基因及其产物的异常表达，国内外均有报道［4～8］，但单独研究早期NSCLC的文献报道极少。为此，作者应用免疫组织化学和PCR-SSCP方法，分析P16蛋白及其基因在Ⅰ期NSCLC中的表达及其二者的相互关系。 　　材料与方法 　　1．组织标本　本院胸外科手术切除并经病理证实为Ⅰ期(T1-2N0M0)NSCLC标本共28例。其中腺癌10例、鳞癌14例、混合型鳞腺癌4例，男性23例、女性5例，年龄43～75岁，平均60.7岁，手术标本分别经液氮冻存或用甲基纤维素包埋,-20℃保存. 　　2．免疫组织化学方法　肺癌手术标本用甲基纤维包埋,5μm冰冻切片.采用免疫人多克隆抗体P16(C-20,San-ta、Cruz.美国)抗体(1:50稀释)作一坑试剂盒(Vector LAB.)显色.阴性对照用PBS替代一抗.判断结果以阳性细胞大于30%为阳性标准. 　　3．DNA提取　液氮保存的标本经蛋白K消化-饱和酚-氯仿提取法提取DNA,用紫光分光光度仪定量.