集胞藻藻胆蛋白降解的蛋白酶分析-protease analysis of phycobiliprotein degradation in polycystis sp..docx

HtrA 在藻胆体降解过程中的水解作用是独立于 NblA 和 NblB 的。研究结果还显示两种金属离子对酶活性基本没有影响，并无促进作用。 通过体外复合物研究可以确认 HhoA、HhoB、HtrA 和 CtpA 四种蛋白酶与 CpcA、NblA 和 NblB 之间未能形成复合物，由此可以确认，NblA 造成的酶活性抑制来自 NblA 与藻胆蛋白亚基之间形成的复合物，并非其与蛋白酶之间形成的复合物。HhoA 与缺氮培养藻上清中的藻胆蛋白也不能形成复合物，故推测在 HhoA 与藻胆蛋白的 降解作用中必然存在某种辅助因子的作用，但是该辅助因子并非 NblA 和 NblB。最后通过荧光定量 PCR 实验分析集胞藻中 13 个蛋白酶基因在缺氮培养不同时 段表达量的变化，根据试验结果推测 pepP 与藻胆体降解的早期启动有密切关系， hhoB、htrA、ftsH、sppA 和 hhoA 这 5 个基因可能在藻胆体降解的中后期发挥作用， 其余 7 个基因 clpP、ape2、sll2008、ctpA、ymxG、gcP、clpB 可能与藻胆体的降解 过程无关。本论文还包括另外两个研究内容，一是对蓝藻藻胆体核-膜连接蛋白 ApcE 缺失 突变体的体外自催化重组研究，构建鱼腥藻 Anabaena. sp PCC 7120 别藻蓝蛋白 ApcE(1-240)的一系列 N 端缺失突变体基因，在大肠