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CIK细胞免疫治疗;我国肿瘤现状;肿瘤;The Three Phases of the Cancer Immunoediting Process;生物治疗的原理;Virchow,对肿瘤免疫渗透进行了描述;免疫细胞类型;细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK);CIK细胞的杀瘤机制
;CIK细胞中的效应细胞是CD3+和CD56+细胞,在正常人外周血中极其罕见,仅1%—5%。
在体外经多因子培养2到3周,CD3+CD56+细胞迅速增多,较培养前升幅可达1000倍以上。
CIK细胞治疗属于过继细胞免疫疗法,由于CIK细胞溶瘤作用是非MHC限制性的,即不受肿瘤组织类型的限制,因此对任何一种肿瘤均有杀伤作用,但对高抗原表达的癌症疗效最好。;;;;CIK细胞治疗适应症;Karnofsky(卡氏,KPS,百分法)功能状态评分标准;CIK细胞治疗禁忌症;细胞治疗示意图;CIK细胞的体外来源;病人采血前注意事项;;仪器:超净台或生物安全柜,离心机、水浴锅、微波炉、天平、移液枪、显微镜
准备材料:剪刀、镊子、培养瓶,离心管/~架,5ml/10ml/25ml移液管,滴管
试剂:CIK培养基,生理盐水,硫酸庆大霉素,各种细胞因子等
消毒用品:75%酒精,无菌纱布,酒精棉球;分离PBMNC;CIK细胞培养流程;CIK细胞回输时的一些准备工作;CIK细胞治疗的副反应及处理;谢谢!;人体外周血单核细胞分离(SOP);注意事项:
整个过程要严格无菌操作;
将血加入淋巴细胞分离液时,必须保持两种液体界面清晰;
用滴管吸取淋巴细胞层时,要掌握好力度,在细胞层上作各方向吸取,勿吸入其他层液体;
操作应轻柔,细胞悬液要充分混匀,避免损伤细胞活力及丢失细胞。;CIK细胞制备(SOP);8. 以后每2~3 d传代一次。10 d后,取细胞悬液送外检(检测细菌、真菌、支原体,结果为阴性方可用);
9. 14 d后,收集细胞,用于细胞治疗;
10. 收集治疗:将生长旺盛的CIK细胞,收集,离心,留样并进行无菌检验,洗涤2~3次,计数细胞数和测定细胞活力(每次输入细胞数要>2×109,细胞活力>95%);
11. 用一次性无菌滤器过滤细胞;
12. 将细胞悬浮于50~100 ml的生理盐水中+IL-2 10万单位+人白蛋白10 ml,混合,封口,用输血速度给病人静脉滴注,2 h内输完;
13.一个疗程为5次,病人可连续输入细胞,也可隔天输入(临床医生决定)。;培养到7天的CIK;培养到11天的CIK
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