gsk3β稳定错配修复蛋白pms2抑制卵巢癌的探索-exploration of gsk 3β stable mismatch repair protein pm s2 inhibiting ovarian cancer.docx

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2018-05-29 发布于上海
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gsk3β稳定错配修复蛋白pms2抑制卵巢癌的探索-exploration of gsk 3β stable mismatch repair protein pm s2 inhibiting ovarian cancer.docx

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gsk3β稳定错配修复蛋白pms2抑制卵巢癌的探索-exploration of gsk 3β stable mismatch repair protein pm s2 inhibiting ovarian cancer

第三部分PMS2可能参与LPS诱导的肿瘤细胞的增殖与迁移目的探讨LPS在诱导肿瘤细胞增殖与迁移中的作用及作用机制，并明确PMS2在其中的作用。方法1.MTT法检测不同浓度LPS作用于卵巢癌细胞株A2780，Angle，NIH：OVCAR-3，Caov3，SKOV3，对细胞增殖的影响。2.Transwell小室法检测LPS对肿瘤细胞迁移的影响。3.Westernblot法检测LPS刺激后，TLR4，MyD88，PMS2，GSK-3β等基因蛋白水平的改变。结果1.LPS刺激可以诱导人卵巢癌细胞A2780，Angle，NIH：OVCAR-3，Caov3，SKOV3的增殖，并且这种作用可以被siTLR4所抑制。2.LPS促进人卵巢癌细胞A2780，Angle，Caov3，SKOV3的迁移，并且这种作用可以被siTLR4部分抑制。3.LPS刺激细胞后，TLR4，MyD88，NFκB的表达增强，而PMS2，IκB的表达下降。结论PMS2可能参与LPS诱导的肿瘤细胞增殖和迁移。关键词GSK-3β，PMS2，TLR4，LPS，迁移。StabilizationofMismatchRepairGenePMS2byGlycogenSynthaseKinase-3βIsImplicatedinOvarianCancerDepartmentofObstetricsandGynecology,UnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnologyPh.D.Candidate:FangHanSupervisor:Prof.ZehuaWangAbstractPartOneTheExpressionandRolesofPMS2,GSK-3βandp-GSK-3βinHumanOvarainCancerCellLinesA2780,Angle,NIH:OVCAR-3,Caov3andSKOV3AbstractObjectiveTheaimofthestudywastoinvestigatetheexpressionofPMS2andGSK-3βmRNAinhumanovariancancercelllines.ToexaminetheexpressionofPMS2,GSK-3βandp-GSK-3βproteininhumanovariancancercelllinesandtoanalyzethecorrelationbetweenPMS2andGSK-3β.ToexploretherolesofGSK-3βandPMS2inhumanovariancancercelllines.MethodsTheexpressionofPMS2andGSK-3βmRNAwasdetectedbyrealtimereversetranscriptionpolymerasechainreaction(realtimeRT-PCR),theproteinlevelofPMS2,GSK-3βandp-GSK-3βinhumanovaraincancercelllinesA2780,Angle,NIH:OVCAR-3,Caov3andSKOV3wasmeasuredbyWesternblot.WeexaminedPMS2,GSK-3βandphosphorylatedGSK-3β(s9)(p-GSK-3β)expressioninovariantumortissuesusingimmunohistochemicaldoublestaining.HumanovaraincancercelllinesweretreatedwithLiClfordifferenttime(0h,12h,24h,and36h)andconcentration(0mM,10mM,20mM,40mM,and80mM),thenthecellproliferationwasdetectedbyMTT.ResultsPMS2andGSK-3βmRNAwereexpressedinhumanovaraincancercelllinesA2780,Angle,NIH:OVCAR-3,Caov3andSKOV3,andtheexpressionofPMS2,GSK-3βandp-GSK-3βproteinweredetectedinthesecells.TheexpressionofPMS2wasnegativelyassociatedwithp-GSK-3β,whileitsmRNAlevelwaspositivelycorrelatedwithGSK-3β.LiClcouldsuppresstheproliferati