hif1a与vegf在稽留流产绒毛组织中的表达及其意义-expression and significance of hif1a and vegf in villi of missed abortion.docxVIP

HIF-1a 与 VEGF 在稽留流产绒毛组织中的表达及其意义专业（妇产科），研究生（刘娟娟），导师（陈虹）摘要 目的：检测HIF-1α及VEGF分别在稽留流产与正常早孕绒毛组织中的表达情况，探寻它们的 表达在稽留流产发生过程中的作用及相互联系。材料与方法：选取50例稽留流产患者的绒毛组织作为实验组，采用免疫组织化学技术检测其HIF-1 α及VEGF的表达及分布，并以50例正常早孕妇女作为对照组；再根据临床病例参数的不同， 在实验组间行组内对照。结果：1.HIF-1α在实验组及对照组绒毛滋养细胞胞浆和胞核表达，其在实验组中灰度值为151.10+19.52，对照组中为 112.30+10.18，t＝-4.319；VEGF 在实验组及对照组绒毛滋养 细胞和血管内皮细胞胞浆中表达，间质略有着色，其在实验组中灰度值为 168.25+17.93， 对照组中为 106.15+11.26，t＝-5.817 ；HIF-1α与 VEGF 在实验组中的灰度值均明显高于 对照组(P＜0.05)，此差异有统计学意义。2.HIF-1α在稽留流产的病因（t＝0.298），患者年龄（t＝0.316）；VEGF 在稽留流产 的病因（t＝0.321），患者年龄（t＝0.254），P＞0.05，此差异均无统计学意义。结论：HIF-1α及 VEGF 在绒毛组织中的表达下降，可降低组织的供氧量，改变细胞命运，使 得胎盘形态发生异常，在稽留流产中，可能与胚胎或胎儿停止发育有关。关键词:稽留流产；绒毛；HIF-1α；VEGF；免疫组织化学前言稽留流产(missed abortion)是指胚胎或胎儿停止发育滞留宫腔内尚未自然排出者， 是流产的一种特殊情况[1]。近年来发病率呈上升趋势[2]，且病因复杂，临床对于其治疗效 果欠佳，使患者身心遭受严重伤害，现已逐渐引起国内外学者的普遍重视。因此，对其发 病机制的探寻有着重要的临床及社会意义。国内外研究结果显示，人类妊娠早期的胎盘发生和胚胎发育是在相对缺氧的环境中进 行的[3]，缺氧对滋养细胞相关的侵袭和分化过程具有重要的调节作用[4]；且成功的妊娠要 求胎盘血管网的充分发育，以满足母胎之间气体和养料的交换以及胎儿代谢废物的排出。缺氧诱导因子1a（HIF-1α）的表达严格地受O2浓度调节；在滋养细胞分化的高峰阶段， 与胎盘发育经历的氧浓度从低到高的梯度变化过程相对应；因此，HIF-1α的变化可能是 滋养细胞分化过程中一个重要的调节因素。血管内皮生长因子（VEGF）一方面可促进新生血管的形成；另一方面能促进血管内皮 细胞及滋养细胞的分裂和迁移；是体内调节血管发生的中枢物质。VEGF在早期妊娠血管生 成中占有主导的地位，其表达异常可能引起胚胎血管生成障碍，从而导致流产发生[5]。本课题选择对滋养细胞相关的侵袭和分化过程具有重要调节作用的HIF-1α及影响绒 毛或胎盘血管生成的VEGF为切入点；采用免疫组织化学技术检测稽留流产绒毛中HIF-1α 及VEGF的表达水平及细胞定位，并以正常早孕妇女作为对照组，初步探讨HIF-1α及VEGF 与稽留流产的关系，以期进一步探讨其在稽留流产发生发展中的机制，以及分析它们之间 的联系，从而为寻找防治稽留流产的措施提供新的思路。材料与方法1．标本来源稽留流产组（实验组）：选自 2011 年 4 月-2011 年 12 月间于贵阳医学院附属医院计划生育门诊就诊的稽留流产患者 50 例。其中有原因组 17 例（曾有自然流产史者 10 例、既往有宫外孕者 4 例、孕期有外伤史者 3 例），不明原因组 33 例；根据患者年龄分为 A 组、 B 组，分别为≤25 岁、＞25 岁；且纳入标准如下：1)平素月经规律，停经 6-11 周，年龄 21-37 岁；2)无急性生殖道炎症、畸形及肿瘤；3)孕期未服用其他药物；4)无内外科合并 症；5)术后病理检查证实为绒毛组织。稽留流产临床诊断标准：停经史；子宫小于停经天 数；B 超下表现为妊娠囊内胚芽或胎儿形态异常，无胎心搏动，或表现为枯萎囊；β-hCG 动态监测表现为不升或下降。正常早孕组（对照组）：选取同期经 B 超证实为活胎，因计划外妊娠自行要求在门诊 行人工流产的正常健康早孕妇女 50 例，设为对照组。且纳入标准如下：1)年龄、孕周与 实验组相匹配；2)既往无自然流产、死胎、妊娠高血压疾病等病史。2．标本采集于人工流产时，将实验组与对照组手术后采集的绒毛组织分别用 0.9%生理盐水冲洗后 立即置于 10%的甲醛溶液中固定 24-48 小时，常规石蜡包埋。其标本组织均经临床及病理 检查证实符合实验条件，临床资料均来自贵医附院计划生育门诊病历、病理科。根据临床 及病理结果参考标准，将收集标本进行组织学分类，稽留流产绒毛组织及正常早孕绒毛组 织各 50 例，如表 1-1