il17和tnfα对鼻息肉上皮细胞中mip3α含量的影响-effects of il 17 and tnf α on mip 3α content in nasal polyps epithelial cells.docx

山西医科大学硕士学位论文学位论文独创性声明本人张敏声明，所呈交的学位论文系在导师夏立军指导下本人独立完成的研究 成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包 含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位 申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中 作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本人按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进 行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或 向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本 人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署 名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：日期：年月日指导教师签名：日期：年月日（本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用）前言鼻息肉是耳鼻咽喉头颈外科中常见且复发率高的疾病，是一种鼻腔和鼻窦黏 膜的慢性炎症病理改变。鼻息肉在组织学上具有炎性细胞（如嗜酸性粒细胞、淋 巴细胞、浆细胞等）浸润的特点，上皮的结构修饰如杯状细胞增生等，固有层的 结构修饰如细胞外基质蛋白聚集、水肿、腺细胞增生和基底膜肥厚[1]。抗生素、 皮质类激素、手术治疗鼻息肉的治疗结果并不十分满意，原因之一就是鼻息肉的 发病机制仍不明确。传统上，认为变应性反应为主要因素[2]。鼻息肉发病机制的 最新研究涉及到各种炎症细胞、炎症介质、细胞因子、趋化因子、免疫分子和免 疫信号转导分子等，发现一些效应细胞如上皮细胞、淋巴细胞、炎症细胞、嗜酸 性粒细胞和成纤维细胞均可能和鼻息肉的发展有紧密联系[3,4]。越来越多的学者认为鼻息肉(nasal polyps，NP)是慢性鼻-鼻窦炎（chronic rhinosinusitis，CRS）的一种分型，常与慢性鼻-鼻窦炎伴发[5]。Bernstein [6]等发 展了“上皮破裂理论”学说并提出“多种因素发病学说”，认为鼻息肉的形成始于鼻 粘膜上皮细胞的损害，而且上皮细胞增殖、嗜酸性粒细胞增多，T细胞和不成熟 树突状细胞的聚集是鼻息肉的典型特征。传统的观点认为，幼稚的CD4+T细胞识别某一抗原后被激活，分化成Th1和 Th2亚型，不同的亚型产生不同的因子，从而在免疫应答中发挥不同的作用。Th1 细胞主要分泌干扰素( IFN) –γ、TNF-α等细胞因子，参与细胞免疫，而Th2细胞主 要分泌IL-4、IL-5等细胞因子参与体液免疫发挥作用。而最近发现一种新型的 CD4+T细胞亚型，命名为Th17 亚型，它则主要通过分泌IL-17等细胞因子来诱导 炎症反应和参与感染的免疫应答[7]。很多研究揭示了Th1、Th2细胞比例失衡对鼻 息肉发病的作用，然而Th1、Th2、Th17细胞之间是否也存在着某种平衡关系， 它们对鼻息肉的形成有何作用？为了解决这一疑问，本课题主要围绕Th1细胞分 泌的促炎因子TNF-α及Th17细胞分泌的促炎因子IL-17对鼻息肉上皮细胞的作用 进行研究，试图揭示Th1、Th17细胞在鼻息肉发病过程中的作用及两者之间的关 系。趋化因子（Chemokine）是由小分子分泌蛋白组成的一个大的蛋白家族, 它 是由淋巴细胞、单核巨噬细胞、树突状细胞和上皮细胞等分泌的。根据N′端高度 保守的半胱氨酸残基的数量和序列的不同被分为4个家族：CC,CXC,XC和 CX3C[8]。巨噬细胞炎性蛋白-3α（MIP-3α），主要被CCL20基因编码，是一种主 要由表皮细胞或黏膜上皮细胞分泌的一类CC-趋化因子，可以诱导白细胞迁移到炎症部位而且可以通过淋巴组织调整白细胞的运输。TNF-α是一种由单核巨噬细胞、Th1、嗜酸性粒细胞等释放的初级炎性因子，它可以刺激大多数结构细胞(如 上皮细胞、成纤维细胞等)释放其他细胞因子，引起炎性反应。IL-17主要由活化 的Th17细胞产生，它可以吸引树突状细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞 向炎症部位聚集，从而参与炎症反应。有文献报道，促炎因子IL-1、IL-17、TNF-α、 脂多糖和病毒感染可以刺激呼吸道上皮细胞分泌的MIP-3α/CCL20增加[9]。本次 实验通过用IL-17、TNF-α刺激人鼻息肉上皮细胞，研究其对MIP-3α/CCL20的影 响，探讨它们在鼻息