利拉鲁肽在高糖环境下对体外培养的小鼠前成骨细胞mc3t3-liraglutide treated mouse preadipocytes mc 3t3 cultured in vitro in high glucose environment.docxVIP
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利拉鲁肽在高糖环境下对体外培养的小鼠前成骨细胞mc3t3-liraglutide treated mouse preadipocytes mc 3t3 cultured in vitro in high glucose environment
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
摘
摘 要
利拉鲁肽在高糖环境下对体外培养的小鼠前成骨细
胞 MC3T3-E1 增殖、分化和凋亡的影响
硕士研究生 李军
导 师 张会娟 教授 郑州大学第一附属医院内分泌科 河南 郑州 450052
摘 要
背景
骨质疏松作为糖尿病的一种慢性并发症,随着糖尿病患病率增加,糖尿病 骨质疏松的患病率也逐年增加。在治疗糖尿病的同时也要对骨质疏松进行治疗。 研究发现部分降糖药物在降低血糖的同时也对骨代谢产生影响。胰高糖素样肽 1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)类似物作为一种新型的降糖药物,广泛用于临 床,其不仅具有降糖作用,还有胰腺外作用。GLP-1 对小鼠成骨细胞的影响, 目前国内外报道少见。
目的
研究不同浓度 GLP-1 类似物-利拉鲁肽在高糖环境下对小鼠前成骨细胞株
MC3T3-E1 增殖、分化及凋亡的影响。
方法
1、实验方法:选用传代小鼠前成骨细胞株 MC3T3-E1,给予 16.5 mmol/L
高糖培养基培养,应用不同浓度的利拉鲁肽(10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L)
I
处理培养的成骨细胞 48h,同时设立对照组(利拉鲁肽 0 mol/L),采用 CCK-8
比色法检测成骨细胞增殖率、流式细胞仪检测细胞凋亡率、实时荧光定量 PCR 法检测成骨细胞分化标志物 COL-Ⅰ、ALP 和 OPN 基因的表达,Western blots 检测凋亡蛋白 Bcl-2 相关 X 蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和抗凋亡蛋 白 B 细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-cell lymphoma/lenkemia-2,Bcl-2)的表达。 2、统计学方法:数据用 xˉ±s 表示,采用 SPSS l7.0 统计分析软件对实验数 据进行分析,多组总体比较采用单因素方差分析(One-way ANOVE),组间两两
比较采用 LSD-t 检验。检验水准α=0.05。
结果
(1)与对照组相比,利拉鲁肽干预组(10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L) 细胞增殖率均显著高于对照组(P0.05),以 10-8 mol/L 利拉鲁肽促进成骨细胞 增殖的作用最显著。
(2)与对照组相比,利拉鲁肽干预组Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶和骨桥蛋白的
mRNA 表达量明显增加(P 0.05),在 10-8 mol/L 浓度组表达量增加最明显。
(3)与对照组相比,不同浓度利拉鲁肽干预组成骨细胞早期凋亡率明显降 低(P0.05),组间两两比较差异具有统计学意义,且在 10-8 mol/L 浓度下凋亡率 最低。
(4)与对照组相比,利拉鲁肽干预组抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增多,且随 着利拉鲁肽浓度增高,Bcl-2蛋白表达呈递增趋势,组间两两比较差异具有统计 学意义。与对照组相比,利拉鲁肽干预组促凋亡蛋白Bax表达明显降低,且随着 利拉鲁肽浓度增高,Bax蛋白表达呈递减趋势,组间两两比较差异具有统计学意 义。
结论
在 一 定 浓 度 范 围 内 利 拉 鲁 肽 在 高 糖 环 境 下 能 够 促 进 小 鼠 前 成 骨 细 胞
MC3T3-E1 的增殖和分化,抑制其凋亡。
关键词:GLP-1类似物;利拉鲁肽;MC3T3-E1细胞;增殖;分化;凋亡
II
Abstract
Abstract
The effects of Liraglutide on proliferation differentiation and apoptosis in mouse pre-osteoblasts MC3T3-E1
Postgraduate Jun Li Supervisor: Prof. Huijuan Zhang
T
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