利用脂肪酸氧化途径阻断方法生产新型pha材料及pha单体可控平台的初步探索-preliminary exploration on production of new pha materials and controllable platform of pha monomers by blocking fatty acid oxidation pathway.docxVIP

学位论文原创性声明 本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研 究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或 其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个 人和集体，均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的 法律责任由本人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允 许论文被查阅和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有 关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编 论文；学校并可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借 阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文，按照 保密的有关规定和程序处理。 本论文属于：保密( )，在 年解密后适用本授权声明。 不保密(√)。 (请在以上括号内打“√”) 作者签名： 导师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 第一章 前 言 聚羟基脂肪酸酯（Polyhydroxyalkanoates PHA）的背景介 绍 PHA 的概述 聚羟基脂肪酸酯（polyhydroxyalkanoates，简称PHA）是一类广泛存在于微 生物体内的高分子生物聚酯，在微生物胞内以颗粒状的内含物形式存在，在 生物体内主要作为碳源和能量的贮藏物质而存在[1,2]。自然界中许多微生物均可 以合成PHA，PHA的结构通式如图 1.1 所示，其分子量一般在五万至一百万道尔 顿之间[3]。 R O ( O CH (CH2)n C )m 图 1.1 PHA的结构通式[2] Fig 1.1 Chemical structure of PHA 其中 n=1、2、3 或 4；通常 n=1，即为聚-3-羟基脂肪酸酯。m 表示聚合度，决定分子量的大小。R 是 可变基团，可为饱和或不饱和、直链或含侧链及取代基的烷基。 PHA与传统的塑料如聚乙烯、聚丙烯等有相似的材料学性质，但其是利用 可再生的能源（如碳水化合物、脂肪酸等）生物合成，并且可以完全降解进入自 然界的生态循环，因此被认为是一种理想的“绿色塑料”，可以用来替代不可降解 的“白色塑料”，而引起世界各国科学界和产业界的广泛重视[4,5]。自上个世纪八 十年代起，关于PHA的研究越来越多，涉及到的学科领域也越来越广。而PHA 除生物可降解性外还具有的生物相容性、光学活性、压电性、气体相隔性等许多 优秀性能，因此同时可作为生物医用材料和生物 可降解包装材料，这已经成为 近年来生物材料领域最为活跃的研究热点。 PHA 的单体组成及分类 上个世纪初，Lemoigne在Azotobacter chroococcum 中发现了一种亲苏丹染 料、可溶于氯仿的类脂肪包涵体[6]，其后又在Bacillus megaterium发现了类似的包 涵体，其组成被鉴定为聚-D-3-羟基丁酸（poly-D-3-hydroxybutyric acid，简称 PHB）。七十年代，除了 3-羟基丁酸（3-hydroxybutyrate, 3HB）之外的其他PHA 单体被发现，如 3-羟基戊酸（3-hydroxyvalerate, 3HV）[7,8]。到了八十年代，在 细菌合成的PHA中发现了更长碳链的单体，如 3-羟基己酸（3-hydroxyhexanoate, 3HHx ）、 3- 羟基辛酸（ 3-hydroxyoctanoate, 3HO ）和 3- 羟基癸酸 （3-hydroxydecanoate，3HD）等单体[9-11]；到目前为止已经发现有超过九十个 属（主要有产碱杆菌属 (Alcaligenes)、假单胞菌属 (Pseudomonas)、甲基营 养菌属(Methylotrophs)、固氮菌属(Azotobacter)、芽胞杆菌(Bacillus)、红螺 菌属 (Rhodospirillum) 等）的细菌可以合成超过 150 种以上不同结构的 PHA[12-16]。其单体涵盖了 3-羟基丙酸（3HP）到 3-羟基十六酸的广泛范围。 同时还有含有一至两个双键的不饱和键的和带有甲基侧链的 3-羟基脂肪 酸，及 4-、5-、6-羟基脂肪酸的非 3-羟基脂肪酸，以及带有其它功能基团 的 3-羟基脂肪酸（3HA）作为PHA的单体[17]。 根据单体的碳原子数不同，可将PHA分为两大类：短链（short-chain-length， scl ） PHA ，其单体由 3-5 个碳原子组成，如 PHB 、聚羟基戊酸酯 （polyhydroxyvalerate，简称PHV）等，其主要合成菌有Ralstonia eutropha(以 前叫Alcaligenus eutrophus)；中长链（medium-chain-length, m