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秸秆与纤维素 纤维素是由D-葡萄糖以β-1,4 糖苷键结合起来的链状高分子化合物，基本重复单位为纤维二糖，具有不溶性的刚性结构，在常温下不溶于水、也不溶于稀酸和稀碱，在自然条件下分解缓慢 秸秆主要组分包括纤维素、半纤维素和木质素,其中纤维素是制约秸秆降解的重要因素. 秸秆利用预处理：粉碎与研磨、高压蒸汽爆破、热解、碱处理、酸处理、氧化处理、生物处理以及几种方法的联合。 纤维素 秸 秆 利 用 纤维素酶 纤维素酶分类 ：根据酶功能分为3 大类：葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶、β-葡萄糖苷酶。 纤维素酶作用机理：C1-Cx假说 、 协同理论、原初反应假说、短纤维形成理论和其他理论。 纤维素酶的来源： ①真菌 ②细菌 纤维素酶的应用：青贮饲料、反刍动物生产、猪、禽、水产养殖、 食品加工及酿造业等。 纤维素酶的应用前景。 产纤维素酶菌种 菌种来源：菜园土、森林土、稻田土、朽木、腐烂秸秆和牛粪堆肥等。 产纤维素酶主要菌种 ：①细菌②真菌 降解纤维素菌种组合：获得混合菌种的方法主要有两种：一种是直接筛选复合菌剂，另一种是选取一些功能菌株进行组合。 细菌 真菌 目前研究和生产中采用的菌种大多是木霉、曲霉和青霉等。 制成酶制剂的有绿色木霉、黑曲霉、镰刀霉、拟青霉和斜卧青霉等的纤维素酶。 菌 种 组 合 木霉+黑曲霉 木霉+青霉 细菌+放线菌 细菌+细菌 里氏木霉+黑曲霉 绿色木霉+产朊假丝酵母 绿色木霉+黑曲霉 黑曲霉+烟曲霉+酵母 优秀菌株的获得 分离 筛选：纤维素选择培养基法、滤纸底物和纤维素天青培养基法、半固体纤维素天青试管法、《P2N》法和纤维素刚果红培养基法 。 纯化：单菌落反复划线纯化，显微镜检，直 得纯菌株 诱变育种 ：紫外线诱变 、原生质体融合 、 利用基因工程技术构建纤维素降解菌。（诱变菌株高产菌株筛选及其稳定性试验） 菌产纤维素酶 纤维素酶的获得：固体发酵（SSF ）和液体深层发酵 。 菌株产酶条件研究 培养温度对产酶的影响 培养基初始p H 值对产酶的影响 接种量对产酶的影响 菌龄对产酶的影响　 酶活的测定 内切纤维素酶活 (CMC 酶活) 内切纤维素酶活（Cx 酶 ） 滤纸酶活 (FPA 酶活) 菌种鉴定 形态学和生理生化特征：微生物分类和鉴定的重要依据之一。原因：一是易于观查和比较；二是许多形态学特征依赖于多基因的表达，具有相对稳定性。 血清试验与噬菌体分型 ：血清试验—包括凝集反应、沉淀反应、补体结合、免疫荧光抗体技术、酶联免疫以及免疫组织化学等方法 。噬菌体分型 —噬菌体对宿主的感染和裂解作用常具有高度的特异性 。 氨基酸顺序和蛋白质分析 核酸的碱基组成和分子杂交 工业化生产 * * 菌产纤维素酶降解 秸秆纤维素 邓 晨 李旭婷 麻贝贝 张娟娟 生 物 系 08 级 4 班 纤维素是由D-葡萄糖以β-1,4 糖苷键结合起来的链状高分子化合物，其基本重复单位为纤维二糖，具有不溶性的刚性结构，在常温下不溶于水、也不溶于稀酸和稀碱，在自然条件下分解缓慢。 秸秆是一种丰富的纤维素可再生资源，我国农作物秸秆年产量逾6 亿t，除少量被用于造纸、纺织等行业或用作粗饲料、薪柴外，大部分以堆积、荒烧等形式直接倾入环境，造成极大的污染和浪费。能源紧张、粮食短缺及环境污染日趋严重是目前世界各国所面临的难题。而可再生资源的转化利用，能在有利于生态平衡的条件下缓解或解决问题。 目前为人们研究较多的微生物中，细菌类有红黄纤维弧菌、普通纤维弧菌、纤维单胞菌属瘤胃球菌、镰状纤维菌和嗜纤维菌、多囊粘细菌、假单胞菌、荧光极毛杆菌。 此外,放线菌中的黑红旋丝放线菌、玫瑰色放线菌和纤维放线菌。 所有能分解晶体纤维素的真菌，均能或多或少地分泌纤维素酶，所以纤维素酶的真菌源非常广泛。 混合菌种组合 ：利用单菌或单酶对未经处理的纤维素材料进行降解非常困难。因此,在自然状态下彻底降解纤维素,要充分重视多种微生物之间的协同作用 。 固态发酵（Solid State Fermentation，SSF）是指利用不溶性原料作为固体支持物和营养物质， 体系无自由流动液体，在其上进行的任何发酵过程。具有能耗小、成本低等优点。 液体发酵：实验过程中多用摇瓶液体发酵获