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第四次课(酶学)
第1节 概念 一、酶的概念 1、概念 酶是由活细胞合成的,对其特异底物具有高效催化作用的特殊蛋白质,也称为生物催化剂。 2、酶促反应式 E+S ES E+P 酶 底物 产物 二、酶促反应的特点 (一)高效性 1×108~20 V 酶促反应 1×101~7 V 有催化剂反应 V 无催化剂反应 反应速度 反应类型 ※ 举例 脲酶催化尿素 过氧化氢酶催化过氧化氢 二、酶促反应的特点 (2)专一性 酶只能催化一种或一类化合物,或一定的化学键,催化一定的化学反应并生成一定的产物,酶对所催化底物严格的选择特性为酶的专一性。 专 一 性 绝对专一性 相对专一性 立体异构体专一性 只能作用一种底物 只能作用一类化合物或一种化学键。 只能作用一种立体异构体。 二、酶促反应的特点 (3)高度不稳定性 酶 蛋白质 物理因素 化学因素 蛋白质 变性 酶失活 二、酶促反应的特点 (4)活性可调节 酶 调节因素 降低活性 提高活性 底物 产物 激素 第2节 酶的结构和功能 一、酶分子组成 酶 单纯酶 结合酶 仅由氨基酸残基构成 如催化水解反应的酶、蛋白酶、 淀粉酶、脂肪酶、磷酸酶、核糖核酸酶等 酶蛋白 辅助因子 + 全酶 × × 无机离子 化合物 B族维生素 B族维生素衍生物 辅基 辅酶 二、酶的活性中心 或称活性部位,指必需基团在空间结构上彼此靠近,组成具有特定空间结构的区域,能与底物特异结合并将底物转化为产物 必须基团 活性中心 底物 催化基团 结合基团 活性中心以外的必需基团 三、酶原与酶原激活 1. 酶原 有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体,此前体物质称为酶原。 2. 酶原的激活 在一定条件下,酶原向有活性酶转化的过程。 3. 酶原激活的机理 酶原 在特定条件下 肽键 断裂 短肽 水解 分子构象发生改变 活性中心 形成 赖 缬 天 天 天 天 甘 异 赖 缬 天 天 天 天 缬 组 丝 S S S S 甘 异 缬 组 丝 S S S S 胰蛋白酶原 活性中心 胰蛋白酶原的激活过程 甘 异 赖 缬 天 天 天 天 缬 组 丝 S S S S 肠 激 酶 4. 酶原激活的意义 避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化,并使酶在特定的部位和环境中发挥作用,保证体内代谢正常进行。 有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要时,酶原适时地转变成有活性的酶,发挥其催化作用。 四、同工酶与酶分子缺陷 概念:催化同一化学反应,但酶蛋白的分子组成、结构、理化性质乃至免疫学性质和电泳行为都不同的一组 酶。 乳 酸 脱 氢 酶 (LDH) 亚基 H型 M型 心肌型 骨骼肌型 H4 H3M H2M2 HM3 M4 LDH1 LDH2 LDH3 LDH4 LDH5 心肌中较多心肌受损的病人可以检测LDH1 骨骼肌中较多 第3节 影响酶促反应速度的因素 酶 蛋白质 本质 性质 变化 影响因素 活性 变化 酶浓度,底物浓度、温度、pH、激活剂和抑制剂。 酶浓度 反应速度 E2 E1 条件:底物浓度足够大 反应速度与酶浓度成正比 [S][E] 一、酶浓度的影响 二、底物浓度的影响 在外界条件不变的情况下,底物浓度[S]对酶促反应速度V的影响作用呈矩形双曲线。 当[S]很低时,[S]与V呈正比关系。 当[S]较高时,V还是随[S]增大,但幅度不如[S]低时明显。当[S]够大时V趋于恒定。 温度/℃ 酶促反应速度 V 四、温度的影响 在一定范围内,温度上升,酶活性增强。 超过一定温度范围,酶活性降低,甚至失活。 最适温度 低温不会使酶失活。 高温会使酶失活。 三、pH的影响 6 最适pH 10 pH 反应速度/相对活力 胰蛋白酶 PH影响酶必需基团、底物等的解离程度。 最适 PH 体外实验选取适当缓冲液 五、激活剂的影响 激活剂指凡能使酶由无活性变为有活性或使酶活性增强的物质。 激活剂 酶促反应必不可少的物 质,否则酶不具催化活性。 必须激活剂 非必须激活剂 非酶促反应必不可少的物 质,缺少时酶活性较弱。 五、抑制剂的影响 凡能使酶催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质统称为酶的抑制剂。 抑制剂 不可逆抑制 可逆抑制 抑制剂与酶活性中心必需基 团共价结合,不能用透析、 超滤等物理方法将其除去。 抑制剂与酶非共价结合, 可用透析、超滤等方法除去, 使酶活性恢复。 可逆抑制 竞争性抑制 非竞争性抑制 抑制剂结
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