灵芝三萜的分离纯化 结构鉴定及其对前列腺癌作用的分析-isolation, purification and structural identification of triterpenes from ganoderma lucidum and its effect on prostate cancer.docx

上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于保密□，在年解密后适用本版权书。不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月56目录摘要1ABSTRACT.7引言13第一节灵芝三萜的研究概况131.1简介131.2灵芝三萜类化合物的结构特征和光谱特征141.3灵芝三萜类化合物的提取和分离201.4灵芝三萜的药理活性研究概况22第二节超临界萃取技术及其在中药研究的应用262.1超临界萃取技术262.1.1超临界萃取技术的原理262.1.2超临界CO2流体萃取的特点282.1.3超临界CO2萃取过程的影响因素292.2超临界萃取技术在中药研究中的应用332.2.1挥发性成分萃取332.2.2生物碱萃取332.2.3甙类萃取332.2.4醌类化合物萃取342.2.5香豆素类萃取342.2.6萜类萃取342.3运用超临界CO2流体萃取法萃取灵芝三萜的展望34第三节前列腺癌的研究概况373.1前列腺癌及其防治373.25α-还原酶与前列腺癌383.2.15α-还原酶.383.2.25α-还原酶与前列腺癌393.2.35α-还原酶的研究进展403.3雄激素及其受体与前列腺癌433.4PSA与前列腺癌453.5中草药在前列腺癌治疗中的应用46第四节本研究的目的意义及主要内容474.1研究的目的和意义474.2研究的主要内容48第一章超临界CO2萃取法萃取灵芝子实体三萜的研究51引言511实验材料511.1材料511.2主要的仪器和试剂522实验方法522.1SFE-CO2萃取灵芝子实体三萜工艺优化522.1.1单因素实验5原料粒度的筛选5夹带剂浓度的筛选532.1.2L16(45)正交试验532.1.3各正交试验萃取物的HPLC分析532.1.4各个正交试验的萃取物对肿瘤细胞K652的抑制542.2SFE-CO2萃取灵芝子实体三萜与醇提法的比较542.2.1醇提法萃取灵芝子实体三萜542.2.2SFE-CO2萃取法和醇提法萃取物的HPLC分析552.2.3SFE-CO2萃取法和醇提法萃取物的生物活性比较552.3中试放大试验562.3.1夹带剂添加方式的比较562.3.2原料粒度的筛选562.3.3萃取时间的筛选572.3.4夹带剂泵流量的筛选573实验结果573.1SFE-CO2萃取灵芝子实体三萜工艺优化573.1.1样品粒度对萃取灵芝三萜的影响573.1.2夹带剂乙醇浓度对萃取灵芝三萜的影响583.1.3正交试验593.2SFE-CO2萃取灵芝子实体三萜与醇提法的比较623.2.1SFE-CO2法与醇提法比较623.2.2SFE-CO2法与醇提法萃取物的生物活性的比较633.3中试实验结果673.3.1夹带剂添加方式对萃取灵芝三萜的影响673.3.2原料粒度对萃取灵芝三萜的影响683.3.3萃取时间对萃取灵芝三萜的影响703.3.4夹带剂泵的流量对萃取灵芝三萜的影响704本章讨论715本章小结73第二章灵芝子实体超临界CO2萃取物中抗前列腺癌活性成分的研究75引言751实验材料751.1材料751.2主要的仪器和试剂762实验方法762.1提取和分部762.2分离7882.2.1乙酸乙酯部分的分部782.2.2氯仿部分的分部792.2.3石油醚部分的分部812.3化合物的理化常数和光谱数据84麦角甾醇(ergosterol)与星鱼甾醇(stellasterol)的混合物84灵芝酮三醇(ganodermanontriol,2)84灵芝醇B(ganoderolB,3)84ergosta-7,22-diene-3β-ylpentadecanoate(5)85ergosta-7,22-diene-2β,3α,9α-triol（8）85灵芝醇A（ganoderolA,9）862.4抑制前列腺癌细胞LNCaP增殖实验873结果873.1分离纯化873.2结构鉴定873.2.1混合物1的结构鉴定873.2.2化合物2的结构鉴定883.2.3化合物3的结构鉴定893.2.4化合物5的结构鉴定903.2.5化合物8的结构鉴定903.2.6化合物9的结构鉴定913.3活性跟踪913.3.1超临界CO2萃取物及个分部部分对前列腺癌细胞LNCaP增殖的抑制作用...913.3.2乙酸乙酯部分分离纯化组份对前列腺癌细胞LNCaP增殖抑制923.3.3氯仿部分分离纯化组份对前列腺癌细胞LNCaP增殖抑制953.3.4石油醚部分分离纯化组份对前列腺癌细胞LNCaP增殖抑制993.3.5