13第十三章转基因技术与作物育种1pp.pptVIP

第十三章 转基因技术与作物育种 第一节 作物的转基因技术 一、植物转基因育种的程序 目的基因的获得 含目的基因重组质粒的构建 受体材料的选择 转化方法的确定和外源基因的转化 转化植株的鉴定与筛选 安全性评价与育种利用 二、植物转基因方法概述 1.农杆菌介导的遗传转化 2.基因枪转基因 3.花粉管通道法 1.农杆菌介导的遗传转化 Ti质粒包括5个区域 1.LB与RB之间的T－DNA，这断序列整合到基因组中；2.质粒转移区（PT）；3.冠瘿碱代谢区；4.复制原点；5.毒性区 根瘤细胞的形成是因为土壤农杆菌中存在着一种诱导瘤细胞（Tumor-inducing)的质粒,这种质粒称为Ti质粒； 农杆菌介导的遗传转化方法研究及宿主范围的拓展 农杆菌较易侵染双子叶植物，对单子叶植物不敏感；通过改变以下条件，现已经获得水稻、小麦、玉米、甘蔗等转基因植株 1.使用酚类物质诱导vir基因表达 2.广寄主范围农杆菌菌株的筛选 3.使用单子叶植物特异启动子和利用分生组织与农杆菌共培养 植株原位转化(in planta transformation) 植株抽真空20分钟，使细菌进入植物细胞间隙，或者将花朵抽真空让细菌进入，甚至直接用菌液浸泡植株 避免了细胞培养过程，单转化效率不高 影响农杆菌转化的因素 农杆菌菌株 农杆菌菌株高浸染活力的生长时期 基因活化的诱导物 外植体的类型和生理状态 外植体的