白花丹醌抑制nf-κb对人胃癌细胞作用及机制-inhibitory effect of plumbagin on nf - κ b on human gastric cancer cells and its mechanism.docxVIP
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白花丹醌抑制nf-κb对人胃癌细胞作用及机制-inhibitory effect of plumbagin on nf - κ b on human gastric cancer cells and its mechanism
目录英文缩略词表1中文摘要3ABSTRACT5第一部分白花丹醌对人胃癌细胞的作用及机制7前言7实验一白花丹醌对人胃癌细胞凋亡与增殖的作用及机制9材料与方法9结果22实验二白花丹醌对人胃癌细胞迁移与侵袭的作用及机制33材料与方法33结果37讨论41参考文献45第二部分白花丹醌对人胃癌细胞NF-ΚB信号通路的调控作用50前言50材料与方法51结果58讨论66参考文献68全文内容小结72综述73博士研究生期间发表的文章85致谢86英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称BSABcl-2Bcl-xLbovineserumalbuminBcelllymphomaBcelllymphoma-xL牛血清白蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2B细胞淋巴瘤/白血病-xLCCK-8cellcountingkit-8细胞计数试剂盒CCK-8COX-2cycloxygenas-2环氧化酶-2DAPI4,6-diamidino-2-phenylindole4,6-二脒基-2-苯基吲哚DMEMdulbeccosmodifiedeaglemedium改良的Eagle培养基DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸ECLenhancedchemiluminescence增强型化学发光ECMextracellularmatrixc细胞外基质EDTAethylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸EdU5-ethynyl-2’-deoxyuridine5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷FBSfetalbovineserum胎牛血清FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素HCLhydrochloricacid盐酸HRPHorseradishperoxidase辣根过氧化物酶ICAM-1intercellularadhesionmolecule-1细胞间粘附分子-1英文缩写英文全称中文全称IC50thehalfmaximalinhibitoryconcentration半数抑制浓度IκBαIKKMDAnuclearfactorκBinhibitorIκBkinasemalondialdehyde核因子κB抑制子IκB激酶丙二醛MTT3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diPhenyl3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐NF-κBnuclearfactor-kappaB核转录因子-κBODopticaldensity光密度值PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PIpropidiumiodide碘化丙啶PBSphosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PMSFphenylmetthanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟PVDFpolyvinyldifluoride聚偏氟乙烯RNAribonucleicacid核糖核酸SDSsodiumdodecylsulfonates十二烷基磺酸钠TEMEDtetramethylethylenediamineN,N,N,N-四甲基乙二胺TNF-αtumornecrosisfactor-α肿瘤坏死因子-αVEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子中文摘要目的:观察白花丹提取物白花丹醌,对胃癌细胞凋亡、增殖、迁移、侵袭的影响,以及对相关蛋白和NF-κB通路的调控作用,初步研究其机制。方法:我们以人胃癌SGC-7901细胞为模型,通过MTT法观察白花丹醌对SGC-7901细胞活性的影响;光学显微镜及DAPI染色后细胞形态及细胞核的变化;应用AnnexinV-FITC/PI双标流式法进一步检测白花丹醌对细胞凋亡率影响;CCK-8法检测白花丹醌是否可以增加TNF-α、顺铂化疗敏感性;用克隆形成及EdU标记法观察药物对细胞增殖的影响;通过流式细胞仪PI单染法检测白花丹醌对细胞周期的影响;细胞划痕检测白花丹醌对胃癌细胞迁移能力的影响;Transwell小室进行体外侵袭实验;免疫共聚焦法检测白花丹醌对TNF-α诱导的NF-κBp65核移位的影响;采用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase3,以及TNF-α诱导的p65、IκBα、IKK的活化,NF-κB下游调节蛋白IAP1、XIAP、Bcl-xL以及转移相关蛋白VEGF、TF、ICAM-1的变化。结果:MTT结果显示,白花丹醌不同浓度作用细胞24小时后IC50为19.12μmol/L。白花丹醌10μmol/L随着作用时间延长对细胞活性的影响增加,在作用24小时后抑制率是对照组的50.63±2.40%,白花丹醌
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