苯并[α]芘对栉孔扇贝生殖内分泌干扰机制的研究-study on the interference mechanism of benzo [ α ] pyrene on reproductive endocrine of chlamys farreri.docxVIP

CYP3A8-like的相似性分别为42%、40%和40%，因此将其归入CYP3A家族。在脊椎动物中CYP3A与机体代谢多种外源污染物和性激素有关。本实验将栉孔扇贝曝污于不同浓度（0.025μg/L、0.5μg/L、10μg/L）的B[α]P染毒10d，分别于3d和10d取样，通过荧光定量PCR技术检测B[α]P对生殖相关基因表达的影响，发现较长时间的B[α]P暴露（10d）会对栉孔扇贝卵巢内类固醇合成酶3β-HSD,CYP17和17β-HSD的基因表达造成剂量依赖性的降低，这与前人的研究结果相一致。因为作者认为3β-HSD，CYP17和17β-HSD可能是B[α]P干扰栉孔扇贝卵巢内类固醇激素合成机制的靶基因。此外，作者还发现，低浓度的0.025μg/LB[α]P上调了AhR、ARNT、CYP1A1、CYP3A、ER和Vg基因的表达，表明其不仅诱导了代谢外源物质的AhR途径的转录活性增加，而且在机体内代谢产生了雌激素效应，但是高浓度10μg/L的B[α]P会抑制上述基因的表达。作者推测这可能是因为在较长时间高浓度的B[α]P暴露造成的毒性超过了机体所能调节的范围，导致无法正常应对外源污染物对解毒代谢基因的诱导，AhR通路不能被正常激活，而代谢外源污染物质的CYP1A1和CYP3A基因也不能被诱导表达。这种超越机体调节能力的污染程度可能会使机体的解毒防御系统面临崩溃，最终对机体造成严重的伤害。低浓度B[α]P暴露下ER-Vg基因表达的升高可能是通过AhR/ARNT通路介导的CYP1A1的活性增加而引起的，而10μg/L的B[α]P会抑制R-Vg基因的表达可能是因为随染毒浓度升高，机体内B[α]P的代谢及毒性增强，对ER信号通路的阻碍性干扰效应增加，最终抑制了ER与Vg基因的表达，也可能是高浓度B[α]P会造成睾酮和雌二醇含量的大幅降低，性激素缺乏导致了ER与Vg基因的表达降低。3B[α]P对栉孔扇贝性腺损伤效应的研究本实验将栉孔扇贝曝污于不同浓度（0.025μg/L、0.5μg/L、10μg/L）的B[α]P染毒10d，分别于染毒后0d、1d、3d、6d和10d取样，通过检测DNA碱解旋分析、脂质LPO水平和蛋白质羰基含研究了B[α]P对栉孔扇贝性腺造成的DNA损伤和过氧化损伤。结果表明0.5μg/L和10μg/LB[α]P可对性成熟期的栉孔扇贝卵巢造成显著的DNA断裂损伤，浓度越高，损伤越严重，并随染毒时间增加卵巢的DNA断裂不能得到修复。不同浓度的B[α]P对栉孔扇贝性腺均造成了脂质LPO与蛋白质羰基化程度的升高，并且MDA、蛋白羰基含量与B[α]P之间存在显著的浓度-效应关系，但是随着染毒时间延长均会不同程度的降低。0.025和0.5μg/LB[α]P处理组的脂质LPO和蛋白羰基含量在实验取样终点时一般能够降至至对照组水平，但是10μg/LB[α]P不能恢复至对照组水平。雄性栉孔扇贝的精巢组织要比雌性栉孔扇贝的卵巢组织更敏感，表现在同浓度的B[α]P暴露在精巢中引起的过氧化损伤均比在卵巢中更显著和/或者更难以得到修复。4B[α]P对栉孔扇贝性腺显微结构的影响本实验将栉孔扇贝曝污于不同浓度（0.025μg/L、0.5μg/L、10μg/L）的B[α]P染毒10d，通过栉孔扇贝的卵巢和精巢的显微结构观察可知，相对于对照组，0.5μg/L和10μg/LB[α]P染毒组的栉孔扇贝卵巢的滤泡内有较大间隙，不成熟、个体较小的卵母细胞明显增多，并且10μg/LB[α]P处理组的卵巢结缔组织发生了损伤，并出现了大量退化或细胞质疏松的卵母细胞；而精巢的滤泡内也有较大空隙，没有充满精子，并且各染毒组的雄性个体精巢中的精子数量均显著降低。这表明，B[α]P可显著抑制栉孔扇贝性腺的发育，并且对栉孔扇贝的性腺产生了一定的毒性。关键词：苯并[α]芘；栉孔扇贝；性激素；基因表达；性腺损伤；显微结构StudyonMechanismforReproductiveEndocrineDisruptingEffectsofBenzo[α]PyreneonScallopChlamysfarreriAbstractPolycyclicaromatichydrocarbons(PAHs)belongtoPersistentToxicSubstances(PTS),includingvarioussubstancesthathavecarcinogenicteratogenicandmutageniceffects.AmongPAHs,benzo[α]pyrene(B[α]P)isthemostcarcinogeniconeandmanystudiesalsoshowthatB[α]Phasendocrinedisruptingeffects.Atpresentstu