鼻腔滴注白细胞介素-22对小鼠变应性鼻炎缓解作用-relieving effect of intranasal instillation of interleukin - 22 on allergic rhinitis in mice.docxVIP

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2018-05-28 发布于上海
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鼻腔滴注白细胞介素-22对小鼠变应性鼻炎缓解作用-relieving effect of intranasal instillation of interleukin - 22 on allergic rhinitis in mice

鼻腔滴注白细胞介素-22对小鼠变应性鼻炎的缓解作用中文摘要中文摘要第一部分鼻腔滴注白细胞介素-22对小鼠变应性鼻炎的缓解作用目的：探讨鼻腔滴注重组小鼠白细胞介素-22（recombinationmurineinterleukin-22/rm-IL-22）对小鼠变应性鼻炎免疫应答的调节作用。方法：将24只6~8周的雌性BALB/c小鼠随机分为3组，每组8只，分别为对照组、模型组和IL-22组。模型组和IL-22组建立小鼠变应性鼻炎模型，同时IL-22组在每次激发前鼻腔滴注rm-IL-22。首先应用间接免疫荧光法检测鼻黏膜上皮细胞是否表达IL-22受体（IL-22R1），最后一次激发后记录三组小鼠10分钟的抓挠数和喷嚏数，应用酶联免疫吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）检测外周血清中卵白蛋白-特异性IgE（OVA-sIgE）的浓度，检测鼻腔灌洗液中干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、白细胞介素-10（IL-10）和胸腺基质淋巴细胞生成素（thymicstromallymphopoietin,TSLP）的浓度，HE染色观察鼻黏膜局部嗜酸性粒细胞浸润情况。最后利用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计学分析，以P0.05为差异有统计学意义。结果：IL-22R1在小鼠鼻黏膜上皮细胞表达，IL-22组较模型组小鼠变应性鼻炎抓挠和喷嚏症状减轻，鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5和外周血清中OVA-sIgE的浓度较模型组降低，局部嗜酸性粒细胞数侵润减少，三组间差异有统计学意义，鼻腔灌洗液中IFN-γ、IL-10和TSLP的浓度在IL-22组和模型组间差异无统计学意义。结论：鼻腔滴注rm-IL-22可以抑制变应性鼻炎小鼠的免疫应答，有望成为治疗变应性鼻炎的一种新方法。关键词：鼻炎；变应性；白细胞介素-22；细胞因子；免疫第二部分三种重组腺相关病毒载体转导增强绿色荧光蛋白在小鼠鼻黏膜的表达目的：探讨重组1、2和8型腺相关病毒（rAAV1、rAAV2和rAAV8）载体经小鼠鼻腔滴注转导增强绿色荧光蛋白（EGFP）基因在鼻黏膜上皮细胞的表达情况。方法：6只6~8周的雌性BALB/c小鼠随机分为3组，每组2只。用带有EGFP基因的重组1、2和8型腺相关病毒进行小鼠鼻腔滴注，第4周处死小鼠，获得小鼠完整鼻腔，固定脱钙后冰冻切片，然后在荧光显微镜下观察EGFP在三组小鼠鼻黏膜上皮细胞的表达情况。结果：rAAV1载体携带的EGFP成功转染，第4周稳定表达，另外两型重组腺相关病毒携带的EGFP均未见在小鼠鼻黏膜表达。结论：rAAV1载体可以转染小鼠鼻腔黏膜上皮细胞，并稳定表达携带的EGFP，可以作为鼻部疾病基因治疗的载体。关键词：腺相关病毒；基因治疗；转染作者：程付伟指导教师：张维天ABSTRACTChater1.Interleukin-22AdministrationintotheNostrilAlleviatesMurineAllergicRhinitisObjective:Toinvestigatetheimmuneregulationwithlocalapplicationofrecombinantmurineinterleukin-22(rm-IL-22)tonasalcavityinmurineallergicrhinitismodel.Methods:Twenty-fourfemaleBALB/cmice(6-to8-week-old)wererandomlydividedintocontrolgroup,modelgroupandIL-22group.Therewereeightmiceineachgroup.ModelgroupandIL-22groupwerepreparedtoconstructtheallergicrhinitismodel.Andmeanwhile,IL-22groupwaslocallyadministeredintonasalcavitywithrm-IL-22beforeeachOVAchallenge.Firstofall,wedetectedwhetherIL-22receptor1(IL-22R1)expressiononthemicenasalepithelialcellsbyindirectimmunofluorescence.Toevaluatetheeffectsofrm-IL-22onsymptomsofallergicrhinitisinmice,thenumberofsneezesandnasalrubswerecountedafterthelastchallengeintenminutes.Theco