大菱鲆4种生物标志物基因的克隆、组织特异性表达分析及重组蛋白制备-cloning, tissue-specific expression analysis and recombinant protein preparation of four biomarker genes in turbot ( scophthalmus maximus ).docx

大菱鲆 大菱鲆 4 种生物标志物基因的克隆、组织特异性表达研究及重组蛋白制备 I I 大菱鲆 4 种生物标志物基因的克隆、组织特异性 表达研究及重组蛋白制备 摘要 大菱鲆（Scophthalmus maximus）原产于北大西洋欧洲沿岸，雷霁霖院士于 1992 年将大菱鲆引入中国，经过 20 年的艰苦努力，大菱鲆已经成为我国北方沿 海主要海水养殖品种。目前，大菱鲆工厂化养殖产业年产量已达 6 万多吨，年总 产值逾 40 亿元。本研究在课题组前期建立的大菱鲆多种组织的高温、饥饿、盐 度胁迫基因表达谱文库中，筛选出涉及大菱鲆摄食、生长、应激等重要养殖生理 调控相关的功能基因，可作为定量评价大菱鲆养殖生理指标的生物标志物，本论 文通过对其 cDNA 全长序列克隆、表达模式研究、功能分析等开展工作，为建 立大菱鲆生理指标的分子检测手段打下基础，并为大菱鲆标准化养殖模式的构建 提供依据。 本论文的主要内容： 1、4 种大菱鲆生物标志物：食欲素（Orexin）、生长催乳素（Somatolactin）、钙 网蛋白（Calreticulin）和谷氨酸脱氢酶（Glutamate dehydrogenase）基因的克隆 和序列分析 本研究采用 RT-PCR 和 cDNA 末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE) 的方法 , 从大菱鲆中克隆得到