青娥丸对肾虚体质大鼠血清igf-1、tgf-β,1的影响-effects of qinge pill on serum igf - 1, tgf - β, 1 in rats with kidney deficiency constitution.docxVIP
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青娥丸对肾虚体质大鼠血清igf-1、tgf-β,1的影响-effects of qinge pill on serum igf - 1, tgf - β, 1 in rats with kidney deficiency constitution
陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果,无抄袭及编造行为。除文中已经加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究所作出的重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律后果和由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名_____日期:年月日关于学位论文使用授权的声明本人授权陕西中医学院保留和使用本人的学位论文,同意其按规定向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名_____日期:年月日论文导师签名_____日期:年月日引言体质是在遗传的基础上,受先后天多种因素的共同影响,并在生长、发育和衰老过程中形成的相对稳定的背景和重要物质基础,也与疾病的发生、发展变化和诊断、防治密切相关。一定的病理体质类型往往是相关疾病发生的主要物质基础,是证候形成和表现的病理基础,具有发生相关疾病的倾向性。中医理论认为肾主骨生髓,骨骼的生长、发育、修复均有赖于肾中精气的充盈、滋养与推动,肾具有生殖和调节代谢的生理效应。肾中所藏的先天之精气,禀受于父母,是形成体质的原始物质,具有遗传的特性,决定着人体先天禀赋的强弱,关系到人一生体质的强弱和正气的盛衰。肾虚体质是临床常见的病理体质类型之一,肾虚体质的形成往往与先天不足、后天房事不节或情志刺激等密切相关。肾虚体质一旦形成,由于肾虚精衰,骨髓亏虚,骨骼失养而表现出骨骼痿软,经常腰酸乏力等症状,甚者发生骨质疏松,导致骨折。现代很多医家在继承《内经》理论基础上,从理论、实验、临床等多角度对肾虚体质进行了研究,但还尚处于初级阶段,关于肾虚体质对骨骼生长发育的内在机制以及如何预防、改善肾虚体质却少有研究。建立具有中医体质理论特色的肾虚质动物模型的方法及改善肾虚体质的补肾中药尚未有成熟报道。本研究以中医体质理论为指导,根据肾虚体质的生理病理特点,采用“猫吓鼠”的经典造模方法,造成具有中医体质理论特色的肾虚质动物模型,并结合现代研究结果,通过观察记录和检测肾虚体质大鼠体重、股骨重等生理指标变化规律及骨代谢指标和骨代谢调节因子的变化,为中医肾主骨理论提供实验依据,同时探讨补肾中药改善肾虚体质的作用环节。第一部分实验研究1.实验材料1.1实验药物青娥丸,南京同仁堂药业有限责任公司生产制造,批号:081204。由杜仲(盐炒)、补骨脂(盐炒)、核桃仁(炒)、大蒜组成。主治与功效:补肾强腰。用于肾虚腰痛,起坐不利,膝软乏力。为棕褐色水蜜丸。金匮肾气丸,辽宁华鑫药业有限公司生产制造,批号:090402。由炮附子、熟地黄、山茱萸、泽泻、肉桂、丹皮、山药、茯苓组成。主治与功效:温补肾阳。用于肾阳不足所致的腰酸脚软,少腹拘急,小便不利或反多。为棕褐色水蜜丸。1.2实验动物SD大鼠,3月龄,雌性40只,雄性20只,体重200g±20g,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,全价颗粒饲料喂养。生产许可证:SCXK(陕)2007-001。雄性土猫2只,4月龄,凶狠善叫,鲜活小鼠喂养。1.3实验试剂血清钙测定试剂盒:由南京建成生物工程研究所提供,批号血清磷测定试剂盒:由南京建成生物工程研究所提供,批号胰岛素样生长因子IGF-1、转化生长因子TGF-β1试剂盒由西安阿尔宝生物技术有限责任公司提供。1.4实验仪器酶标仪RT-2100C深圳市雷杜电子有限公司低速离心机KDC-40科大创新股份有限公司电子天平DT-500北京医用天平厂电热恒温培养箱DHP-9052型上海一恒科技有限公司半自动生化分析仪BA-90深圳迈瑞公司产品。分光光度计721上海精密科学仪器有限公司2.实验方法2.1动物模型的建立在实验动物中心适应性饲养一周,温度20℃-28℃之间,相对湿度70%-80%,定时通风换气。将雌、雄大鼠按2:1的比例每晚合笼配对5天,发现怀孕后编流水号分笼饲养。待40只雌鼠全部怀孕后,随机分为Ⅰ组20只,Ⅱ组20只。采用王氏报道的猫吓鼠方法[2]将Ⅱ组孕鼠每日上午8:00~10:00、下午14:00~16:00直接置于猫笼旁进行恐吓。让猫与大鼠仅一网之隔,使猫爪能碰到但无法抓到大鼠为度。并于每天上午9:00、下午15:00取分笼后的雄鼠喂猫示众,使孕鼠惊恐伤肾。交配后19天~21天,子鼠陆续出生,停止恐吓。Ⅰ组不施加任何外界刺激,让其自然生长产子。不予恐吓的时间里,两组大鼠均置于同一实验室,务求非实验因素的一致。待子鼠出
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