不同杀菌剂对苹果腐烂病防治效果.docxVIP

ADDIN CNKISM.UserStyle不同杀菌剂对苹果树腐烂病的防治效果 苹果腐烂病(Valsa mali)是苹果上重要的枝干病害，主要危害枝干，造成枝干皮层坏死，削弱树势，导致死枝、死树，重着毁园，严重制约着苹果产业的发展。 苹果腐烂病最早于1903年在日本发现并报道，1916年在我国辽宁省首次发现，目前，该病主要分布于东亚地区，我国各苹果产区均有发生，其中北部地区受害最为严重[1]。自解放初期，苹果树腐烂病在我国已出现了四次大规模流行。2008年调查显示，中国10个苹果主产省市的147个果园内，苹果树的总体发病率为52.7%，其中河南省发病率高达85.1%[2]。 苹果树腐烂病菌属于弱寄生真菌，主要从剪锯口、冻伤、日灼伤等处侵染，也可通过芽眼、叶痕、果痕等处的微伤口侵染，具有潜伏侵染的特性[3-6]。剪锯口是最易受腐烂病菌侵染的部位，也是腐烂病菌的主要侵染孔口[7]。2011年在烟台地区果园内检查了967块新病疤，其中源自剪锯口侵染的病疤占80.04％[8]。从剪锯口侵染的腐烂病菌，主要潜伏于木质部的导管内，并不能立即致病，腐烂病菌在木质部内可以潜伏3~5年，条件适宜时，腐烂病病菌在木质部导管内生长扩展到达皮层，才能导致剪口皮层的发病[9-12]。 苹果树腐烂病属于枝干病害，且所有的苹果品种对于腐烂病菌均没有有效的抗性,因此一旦腐烂病菌由伤口侵入到寄主组织的韧皮部深至木质部时，由于传统杀菌剂无法完全渗透寄主组织，从而很难起到有效的防治效果，因此保护剪锯口和枝干不受腐烂病菌的侵染是防治腐烂病发生的首要措施。本研究通过在活体枝条接种、施药，离体诱导发病测试了5种杀菌剂对腐烂病发病的抑制作用，以及在离体枝条剪口上先接种后施药和先施药后接种的方法，评价了3种杀菌剂的内吸治疗效果和8种杀菌剂的保护效果及持效期，为苹果树腐烂病菌从剪锯口侵染的化学防治提供可靠依据。 1 材料与方法 1.1供试病原菌 2009年8月自陕西省白水县雷牙乡采集苹果树腐烂病病枝，切取病健交界处的病组织转入马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）中，分离获得腐烂病菌(Valsa mali)。用直径0.8mm的毛细管，自菌落边缘打取菌丝的端部转入PDA中，获得单菌丝分离菌株，编号为LXS080901，活化前在4℃冰箱中保存。用农杆菌介导转化法(ATMT)将携带潮霉素B磷酸转移酶基因(hph)和绿色荧光蛋白表达基因(gfp)转入腐烂病菌，获得转化子LXS080901-3。经离体和活体测定，转化子LXS080901-3和野生菌株LXS080901的生物学性状、致病性、以及在苹果枝干上形成的症状都没有差异，与田间自然发病情况一致[13]。2个菌株都保存于4°C的冰箱中。 接种前，将保存菌种从冰箱中取出，接种于PDA培养基中，25°C下黑暗培养3~5天，取菌落边缘直径5mm新鲜菌饼，接种于大麦粒培养基（大麦粒70g，蛋白胨1%，6%蜂蜜水，121℃灭菌60分钟），25℃恒温箱中培养15天，大麦粒上可产生大量分生孢子器。取产生分生孢子器的大麦粒，转入含有1%水琼脂直径为9cm培养皿中，25°C下保湿培养3天，分生孢子器中溢出大量橘黄色分生孢子角[14]。挑取新鲜分生孢子角置于纯净水中，配成106个/ml孢子悬浮液用于接种枝条。转化子接种的材料在试验结束后全部销毁。 1.2供试杀菌剂 根据已有经验和报道，选取对苹果腐烂病可能有效，且生产上常用的8种杀菌剂，试验用量为厂家推荐用量，杀菌剂的种类和生产厂家见表1。 表1 试验所测试杀菌剂的种类及生产厂家 Table 1 Tested fungicides and manufacture in this study 有效成分通用名称 Common name of effective components制剂 Formulation生产厂家 Manufacturer吡唑醚菌酯 Pyraclostrobin25%乳油(EC)巴斯夫欧洲公司戊唑醇 Tebuconazole43%悬浮剂(SC)拜耳作物科学（中国）有限公司苯醚甲环唑 Difenoconazole10%水分散粒剂(WG)瑞士先正达作物保护有限公司甲基硫菌灵Thiophanate-methyl 70%可湿性粉剂(WP) 兴农药业（中国）有限公司百菌清 Chlorothalonil40%悬浮剂(SC)日本史迪士生物科学柱式会社代森锰锌 Mancozeb80%可湿性粉剂(WP)印度印地菲尔化学公司1:100 硫酸铜溶液 1:100 cupric sulfate现配现用1:2:100波尔多液 1:2:100 Bordeaux mixture现配现用1.3内吸治疗效果 采用先接种后施药的方法，以清水为对照，测试