肝细粒棘球蚴周围纤维囊壁形成机制初步探索-preliminary study on formation mechanism of fibrous capsule wall around hepatic echinococcus granulosus.docxVIP

1前言肝囊型包虫病（Hepatichydaiddisease）属于人兽共患性疾病，人类作为中间宿主而受害。由细粒棘球绦虫（EchinococcusgranulosusE.g）的幼虫入侵肝脏后致病，以形成寄生虫性肝包囊为特征，故又称作肝细粒棘球蚴病。目前，在临床上，对肝包虫病的研究主要集中在低复发、低残腔并发症且操作简单、安全的手术方法的寻找上，并且随着实践中外膜的发现，一种新的手术治疗方法“肝包虫外膜内完整摘除术”.相应出现，这种手术方法，确实为不少病人解除了病痛。但是，在分子方面，肝包虫发病机制的研究主要集中在免疫组化检测、分子标记等方面，并没有现代分子生物学技术的应用。1.1肝细粒棘球蚴外囊形成机制的研究进展1.1.1外囊形成机制的传统观点刘瑾厚[1]等认为，肝细粒棘球蚴周围纤维囊壁是人体受到刺激后，产生免疫应答进而新生出的纤维结构。吴少廷[2]等则认为肝细粒棘球蚴周围纤维囊壁是肝实质细胞逐步调亡、纤维化产生的结果。Farrokh[85]等的研究表明，肝细粒棘球蚴周围纤维囊壁是一层被挤压的非上皮细胞化的纤维组织，它与周围肝实质之间无解剖性分离间隙。顾树南[3]认为，肝细粒棘球蚴周围纤维囊壁是由新生成纤维细胞形成的纤维结缔组织，并且这些组织与周围肝脏组织无明显的界线。这些观点都认为肝细粒棘球蚴周围纤维囊壁是人体防御反应或肝实质纤维化的结果，并且都认为肝实质与外囊是不可以分开的。1.1.2“外膜”结构的发现彭心宇[4]教授从1999年开展了肝包虫根治性手术的研究，并且成功地发现肝细粒棘球蚴纤维性囊壁的病理组织结构与传统理论不符，肝细粒棘球蚴的纤维性囊壁可分为两层：靠近虫体一侧的纤维层为外囊，靠近肝实质一侧的纤维层为“外膜”。外囊与“外膜”间存在一可分离间隙，手术中沿此间隙可完整将包囊摘除，由此首创了“肝包虫外膜内完整摘除术”.，这种手术方法有效地解决了包虫病复发和残腔并发症的问题，在最大程度上减少了手术对肝实质的损伤，并由此引发了科研工作者对纤维囊壁形成机制的进一步探索。1.1.3免疫组化技术在外囊形成机制研究中的应用免疫组化技术的原理在肝包虫相关的研究中，主要应用到的免疫组化技术是酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接红细胞凝集试验(IHM)、皮内过敏试验(ID)等[5]。其中ID兼具简易性,敏感性两特点,适合大规模普查,特别是牧区和边远地区。IHM也主要用于临床检测。而在肝包虫发病机制研究中应用最广泛的是ELISA。酶联免疫吸附分析法是把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一种检测技术。该技术主要的依据有三点：第一、抗原（抗体）能结合到固相载体的表面仍具有其免役活性；第二、抗体（抗原）与酶结合所形成的结合物仍保持免疫活性和酶的活性；第三，结合物与相应的抗原（抗体）反应后，结合的酶仍能催化底物生成有色物质，而颜色的深浅可定量抗体（抗原）的含量。酶联免疫吸附分析法主要有三种测定方法：即间接法，抗体夹心法和竞争法。前两种方法主要用于测定抗体和大分子抗原，适用于临床诊断上，而竞争法是测定小分子抗原的方法，因而尤其适用于食品卫生分析。由于食品卫生分析中所测定的物质大都是低分子量的，但免疫动物产生抗体的抗原其分子量要求必须很大（至少50KD），因此，首先必须将小分子物质结合上高分子蛋白质，才能作免疫之用，而为了能使小分子物质结合上高分子蛋白质，则必须在小分子物质上导入一个活性基团，同时直接竞争法所需的酶标抗原的制备也需首先在小分子物质上导入一个活性基团。目前，酶联免疫吸附分析法已经被广泛的应用到各种疾病的研究之中，并取得了一定的成果。同样，在肝包虫纤维囊壁形成机制的研究过程中，该项技术也被广泛的应用。包囊纤维囊壁的免疫组化检测免疫组化技术、被广泛的应用到肝包虫的临床诊断，主要通过对血清中IL-10等进行监测来确诊[6]。近期，免疫组化分析已广泛应用于检测肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁以及周围肝脏组织中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原[7]以及MMP-1、MMP-3、MMP-9、TIMP-1等的表达[8]的研究中，并取得了很大的进展。初步证实了肝细粒棘球蚴近肝侧外层纤维囊壁(外膜)与近虫体侧内层纤维囊壁(外囊)形成机制不同[9]：外层为受挤压的Glisson系统和肝静脉系统纤维化所致，并初步认为内层为肉芽肿反应的产物。肝包虫外囊为一层致密、排列紊乱的纤维组织，常玻璃样变和不同程度的钙化，无血管。靠近虫体侧可见成片的坏死区，偶见内层包绕虫体角皮层碎片，上皮样细胞，多核巨细胞及淋巴细胞浸润，形成规则的肉芽肿，周围有单核细胞、淋巴细胞、及嗜中性粒细胞浸润。“外膜”为肝脏组织与外囊之间一层排列规则的增生纤维膜，疏松或紧密排列，其内有较多扩张小血管、小胆管、神经、淋巴管等，临近肝脏组织内纤维组织增生，并分割包绕肝实质形成大小不等的假小叶，小叶间肝管