发酵工艺学课件第12篇 章 维生素生产工艺学.pptVIP

第十二章 维生素生产工艺;概述;市场;第一节 维生素C生产工艺;维生素C是目前世界上产销量最大，应用范围最广的维生素产品。今年前三季度，我国维生素C产量为69801.99吨，同比增长29.9%。目前，工业上生产维生素C采用二步发酵法，属我国首创。发酵法生产维生素C可以分为发酵、提取和转化三大步骤。即先从D-山梨醇发酵，提取出维生素C前体2-酮基-L-古龙酸，再用化学法转化为维生素C。;1、菌种 ; 二步发酵法的整个工艺流程可分为发酵、提取、转化和精制四部分。 （1）第一步发酵 ???黑醋酸菌（Acetobacter?suboxydans）经种子扩大培养，接入发酵罐，种子和发酵培养基主要包括山梨醇、玉米浆、酵母膏、碳酸钙等成份，pH?5.0~5.2。醇浓度控制在24~27%，培养温度29~30?℃，发酵结束后进行低温灭菌，移入第二步发酵罐作原料。D-山梨醇转化L-山梨糖的生物转化率达98%以上。;?（2）第二步发酵：氧化葡萄糖酸杆菌(小菌)和巨大芽孢杆菌(大菌)混合培养。生产维生素C的发酵罐均在100?m3以上，瘦长型，无机械搅拌，采用气升式搅拌。种子和发酵培养基的成份类似，主要有L-山梨糖、玉米浆、尿素、碳酸钙、磷酸二氢钾等，pH?值为7.0。大、小菌经二级种子扩大培养，接入含有第一步发酵液的发酵罐中，29~30?℃下通入大量无菌空气搅拌，培养72h左右结束发酵，L-山梨糖生成2-酮基-L-古龙酸的转化率可达70~85%。;经二步发酵法两次发酵以后，发酵液中仅含8%左右的2-酮基-L-古龙酸，且残留菌丝体、蛋白质和悬浮的固体颗粒等杂质，常采用加热沉淀法、化学凝聚法、超滤法分离提纯。传统工艺是加热沉淀法，发酵液经静置沉降后通过732氢型离子交换树脂柱，调节pH至蛋白质等电点，并加热使蛋白质凝固，然后用高速离心机分离出菌丝、蛋白和微粒，清液再次通过阳离子交换柱，酸化为2-酮基-L-古龙酸的水溶液，浓缩结晶后得到2-酮基-L-古龙酸。;2-酮基-L-古龙酸的化学转化：将维生素C前体2-酮基-L-古龙酸转化为维生素C，常采用碱转化法。2-酮基-L-古龙酸在甲醇中用浓硫酸催化酯化生成2-酮基-L-古龙酸甲酯，加NaHCO3转化生成维生素C钠盐，经氢型离子交换树脂酸化得到维生素C。粗品经结晶精制得维生素C成品。;三、新二步发酵法;第二节 维生素B2发酵;一、概述;碳源：以植物油、葡萄糖、糖蜜或大米等作为主要碳源，植物油中以豆油对维生素B2产量的促进效果最为显著。 氮源：有机氮源以蛋白胨、骨胶、鱼粉、玉米浆为主。 无机盐有NaCl、K2HPO4、MgSO4。;三、发酵工艺;发酵液酸化后加热，然后加入黄血盐、硫酸锌沉淀蛋白，过滤后滤液调pH?1.5~2.0酸化，静置20~40h沉淀，压滤后将沉淀物酸溶，加入硝酸铵，氧化抽提，氧化液经结晶、过滤后，湿晶在80?℃以下干燥20h，得到维生素B2成品。 ;第三节 维生素B12发酵;???维生素B12又称钴胺素(cyanocobalamin)，是一种含有钴的咕啉类有机化合物，为深红色结晶或结晶粉末。是一种水溶性维生素。人类和动植物都不能合成维生素B12，维生素B12参与体内甲基转换及叶酸代谢，促进神经髓鞘中脂蛋白的形成，保持中枢神经和外周髓鞘神经纤维的功能完整。;目前，维生素B12的主要生产国（企业）为中国、印度的Workhard和法国的罗纳公司。在中国，最早由华北药厂于1966年开始从链霉素废液中提取维生素B12，开始产量只有几公斤，至20世纪90年代开始陆续引进菌种，先在厌氧发酵条件下进行培养，发酵单位只有20U/ml左右，产量不能大幅增加。然后又引进新菌种在好氧发酵条件下培养，发酵单位才超过100U/mL的水平。由于采用新工艺、新技术，发酵单位和收率逐步提高，产量才开始大幅提高。20世纪70年代，国内维生素B12产量为几十公斤，80年代为150公斤，1997年为2.33吨，1999年为3.4吨，2000年为4.256吨，2001年为6.18吨，2003年上升到10吨以上。国内的主要生产企业有华北制药集团、石药集团。;三、菌株;四、生产工艺;;2、好氧发酵工艺