生物化学第九篇 章 核酸的生物合成.pptxVIP

习题;习题;;第九章 核酸的生物合成;核酸的生物合成;一、DNA的自我复制;半保留复制;Testing Models for DNA replication;子链继承母链遗传信息的几种可能方式; ——实验结果支持半保留复制的设想。;按半保留复制方式，亲代DNA分子的一条DNA链保留在子代DNA分子中，可使遗传信息准确的传递给子代细胞，保持其相对稳定性而不致发生变化。;DNA复制的酶学;复制的化学反应;DNA聚合酶催化的链延长反应;DNA聚合酶的反应特点;DNA聚合酶;;原核生物的DNA聚合酶; DNA polⅠ DNA polⅡ DNA pol Ⅲ;功能：对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补。;DNA-pol Ⅱ（120kD）;功能 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。 ;复制起始相关蛋白;解螺旋酶(helicase) ——利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链 引物酶(primase) ——复制起始时催化生成RNA引物的酶 单链DNA结合蛋白(single stranded DNA binding protein, SSB) ——在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整 ;;解链过程中正超螺旋的形成;拓扑异构酶作用特点 既能水解 、又能连接磷酸二酯键;拓扑异构酶Ⅰ;DNA连接酶;;DNA连接酶在复制中起最后接合缺口的作用。 在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。 也是基因工程的重要工具酶之一。;原核生物DNA复制过程;大约20个各带1分子ATP的Dna A蛋白结合于复制起点上4个9bp的重复区域，使DNA围绕着复合物卷成一圈。 在类组蛋白HU的参与下，Dna A蛋白识别并成功地变性原点的13bp重复序列。 Dna B（解螺旋酶）六聚体随即在Dna C帮助下结合于解链区。 Dna B借助水解ATP产生的能量，沿DNA链5′ ——3′方向移动，解开DNA的双链。;DNA双链的解开还需要DNA旋转酶（拓扑异构酶II）和单链结合蛋白（SSB）。;;②复制的延伸;;领头链（前导链）的合成;随从链（滞后链）的合成;阶段一;阶段三;③DNA复制的终止;A. 环状双链DNA及复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点(termination, ter);大肠杆菌环状DNA的两个复制叉相遇。它们相遇在包含有多个拷贝，具有20bp，称为Ter序列的终止区 。 Ter序列是终点利用蛋白Tus的结合位点。;复制的基本规律;二、逆转录;逆转录???毒细胞内的逆转录现象;逆转录酶是一种多功能酶，它兼有三种酶的活力： ①利用RNA作模板，在其上合成出一条互补的DNA链，形成RNA-DNA杂种分子（RNA指导 的DNA聚合酶活力； 具有核糖核酸酶H的活力，专门水解RNA-DNA杂合分子中的RNA； 在新合成的DNA链上合成另一条互补DNA链，形成双链DNA分子（DNA指导的DNA聚合酶活力）。 ;HIV是一类逆转录病毒，它感染（主要是T淋巴细胞）后即杀死细胞，造成宿主机体免疫系统损伤，引起艾滋病（AIDS）。;习题;三、DNA损伤、修复和突变;物理因素 紫外线(ultra violet, UV)、各种辐射;化学因素;修复(repairing) 是对已发生分子改变的补偿措施，使其回复为原有的天然状态。;（一）光修复;;（三）重组修复;（四）SOS修复;第二节 RNA的生物合成;本节的要求; 1.转 录 概 述; 1.1 转录的条件;在转录过程中，双链DNA中只有一条链可作为模板，称为模板链或反义链，也可表示为负（-）链。 与之相互补的另一条链则称为编码链或有义链，表示为正（+）链。 ;; 1.2 转录特点;不对称转录;腺病毒基因组编码的遗传信息 全长36000bp，其两条DNA链都可用来编码蛋白质。许多上方链的mRNA是以一个长转录单位为转录的，然后被剪切成独立的一个个mRNA。;1.3 原核生物的RNA聚合酶;启动子（promoter）：RNA聚合酶识别，结合并确定转录起始位点的一段DNA序列。 它一般位于转录起点的上游，约包括40个碱基对。;原核生物的RNA聚合酶;(1) 模板识别 (2) 转录的起始 (3) RNA链的延长 (4) 转录的终止 ;(1) 模板识别 ?识别启动子;;根据对100多个基因碱基序列的分析，大肠杆菌的启动子至少两处共同顺序， -35顺序，Sextama框， σ亚基识别部位 -10顺序，Pribnow 框，RNA聚合酶全酶紧密结合部位.-10序列处的碱基富含AT，有助于DNA双螺旋的局部解链。 ;两序列之间的距离最重要，17bp时转