生物化学课件第六篇 章核酸化学代谢DNA合成.pptxVIP

;;DNA的生物合成：细胞内合成DNA的过程 1、复制：以DNA作为模板指导的DNA合成，即将DNA携带的信息传至子代DNA。 四种核苷酸（dATP\dTTP\dCTP\dGTP） 2、 反转录：DNA合成也可以RNA为模扳指导合成作用，见于RNA病毒。 3、修复合成：当各种因素引起DNA损伤时，损伤DNA可修复合成，校正错误，完成正确合成，以保持DNA结构 的稳定性和遗传信息的准确性。 ;1、DNA的半保留复制;DNA的半保留复制实验依据;大肠杆菌三种DNA聚合酶比较;DNA聚合酶的3′- 5′外切酶水解位点（I、II、III）;DNA聚合酶5′- 3′外切酶活力（I）;大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构和功能（10个亚基）; 图 11-8 DNA Pol III的二聚体作用;（2）连接酶连接切口;3、原核细胞DNA的半不连续复制 复制过程 semidiscontinuous replication ;（1）复制的起始点与方向 亲代DNA开链，复制起始点呈叉型移动。 ⊙复制起始点： DNA复制要从DNA分子的特定部位 开始，此部位称复制起始点。 原核：仅含一个 ，约245 bp, 特殊的重复序列。 真核：多个起始点 例：酵母17号染色体含400个。 ⊙复制方向：含三种机制 ?一个起点2个叉，不同方向合成两条链，此为常 见方式。 ?2个起点，2个叉，各合一条链（腺病毒）。 ?一个起点一个叉，同方向合成两条链（质粒Col EI）--单向复制;DNA的双向和单向复制----起始;大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列;（2）原核细胞DNA的半不连续复制复制过程;聚合酶III核心酶;复制叉处前导链和随后链同时合成的工作模型;（3 ）大肠杆菌染色体复制的终止;（4）复制的忠实性;DNA聚合酶的校对功能;起始时以RNA作为引物的作用;4、真核生物复制的特点 （1）复制速度：是原核的1/10，但复制起始点多。 （2）引物和冈琦片段小于原核，引物为10个，片段100~200；原核引物十几~几十，片段1000~2000。 （3）复制需DNA pol及多种因子参加， pol ? pol ?在核内起主要作用。 （4） pol ?为线粒体复制酶。 （5） DNA复制位于细胞周期的S期。;真核细胞DNA复制的特点;真核生物的DNA聚合酶;;端 ?? 端粒：真核生物线性染色体的两个末端具有特殊结构称为端粒。 端粒由许多成串的短的重复序列组成。一条链上富含G，如人的端粒TTAGGG，原生动物四膜虫为TTGGGG,植物 TTTAGGG 。 端粒的功能：稳定染色体末端结构，防止末端染色体降解；防止染色体间末端连接。（原核生物染色体是环状的， 5 ′末端冈奇片段的RNA引物被除去后可借助另半圈DNA链向前延伸填补。） ;端粒酶（telomerase）;;;;;真核和原核DNA细胞复制比较;小结： 一、半不连续合成;二、复制过程和参与酶及因子 （一）复制的起始（分两步） 1、螺旋的松弛与解链 （1）拓扑异构酶---能改变DNA空间构型的酶 作用： DNA复制时松弛超螺旋，以利复制叉的行进及DNA合成，合成后再引向超螺旋。 功能：不清楚，可催化体外拓扑异构化反应，分两型。;?拓扑异构酶I （topoisomerase-- I ）作用： 松弛超螺旋，不需ATP, 机制：切开环状一条链 打结与解结 环状双链DNA的合成 环连与解环连 原核：对负超螺旋?正 真核：对正、负均有作用。 ?拓扑异构酶I I ----旋转酶（gyrase） 作用： 松弛超螺旋 松 + ATP 超 （ - ） 切开环状两条链 打结与解结 环连与解环连; （2）解链酶 （helicase）------复制蛋白rep 作用：ATP供能时，解开DNA双链。 原核：编码解链酶的基因是dnaB,DnaB表示蛋白产物。前导链结合rep蛋白，随从链 结合解链酶II Ⅲ。 （3）单链结合蛋白-single strand binding protein-SSB 作用： ? SSB与解开DNA单链结合，保护稳定DNA。 ?与新复制DNA单链结合，以防降解。 超螺旋DNA 拓扑酶 松弛 解链酶 解开双链 SSB 复制开始;2、引发 （需引发酶及引发前