荧光原位杂交技术(FISH)在泌尿系统肿瘤领域的应用.pdfVIP

·184· 塑垦竺堕月中擅盘查 6 第2卷第3期 JContempUrolReprodOncol，June2010，Volz，No．3 · 综 述 · 荧光原位杂交技术 (FISH)在泌尿系统肿瘤领域的应用 原小斌 王东文 doi：10．3870／j．jssn．1674—4624．2010．03．019 一 、 荧光原位杂交 (fluorescenceinsituhybridization， UroVysion，检测 3号、7号、17号染色体及 9p21位点。2001 FISH)技术概述 年 ，Bubendor{等_3详细描述 了UroVysion试剂盒检测膀胱 1969年 ，Gall和 Pardue等首次将 同位素探针用于原位 肿瘤的方法，指出该法能显著提高膀胱肿瘤早期检出率。此 杂交实验 ，获得成功。1987年 ，染色体原位抑制杂交法 的创 后涌现大量相关研究报道 ，讨论 的焦 点主要集 中在 FISH技 建，使 FISH技术得 以迅速发展 。随后 ，Cremer等用生物素 术与传统检查方法在膀胱肿瘤早期诊断及术后复发监测方 和汞或氨基 乙酰荧光素等非放射性物质标记探针 ，创立 了双 面优缺点的比较与评估上 。 色 FISH技术 。1990年 ，Nederlof等用 3种荧光素成功探测 FISH技术检测 的敏感性及特异性是人们持续关注的热 出了3种以上的靶位 DNA序列，从而宣告了多色 FISH技 点问题 。各临床试验结果 提示 ，FISH技术在早期诊断方 术 的问世 。 面具有 比尿脱落细胞学检查更高的敏感性 ，但对低分级肿瘤 FISH技术是一种非放射性分子遗传学实验技术 ，其基 而言，其绝对敏感性偏低 。在诊断的特异性方面 FISH技术 本原理是将直接与荧光素结合 的寡聚核苷酸探针或采用间 略低于尿脱落细胞学检查 。 接法用生物素、地高辛等标记 的寡聚核苷酸探针与变性后 的 FISH技术对于膀胱肿瘤术后复发监测方面有潜在价 染色体、细胞或组织 中的核酸按照碱基互补配对原则进行杂 值 。Yoder等_g公布的一项研究结果表明，约有 27 的尿脱 交，经变性一退火一复性一洗涤后即可形成靶 DNA与核酸探针 落细胞学检查阴性或不典型的患者在 尚无明确肿瘤证据时 的杂交体 ，直接检测或通过免疫荧光系统检测 ，最后在荧光 行 FISH检测结果呈 阳性 。经过 29个月的随访 ，这些患者 中 显微镜下显影 ，即可对待测 DNA进行定性 、定量或相对定位 65 被证实肿瘤复发 。由美 国FDA主持完成 的一项研究结 分析 。 果显示 ，36例膀胱镜复查结果呈阴性而 FISH检查结果呈 阳 FISH技术有 以下几点优势 ：①安全 、快速 、灵敏度高 ； 性 的患者 ，通过随访 ，15例 (42 )证实肿瘤复发 ，复发确诊时 ②探针能较长时间保存 ；③多色标记 ，简单直观 ；④可用于 中 间为 3～16个月不等 (平均 6．0个月) 而在 68例膀胱镜检 期染色体及间期细胞 的分析 ；⑤可应用于新鲜、冷冻或石蜡 查和FISH检查结果均呈阴性的患者 中，只有 13例(19 )在 包埋标本 以及穿刺物和脱落细胞等多种物质 的检测 。 3～19个月(平均 11．2个月)的时间里被病检证实为肿瘤复 二 、FISH技术在泌尿系统肿瘤领域的应用 发。那些膀胱镜复查结果 阴性而 FISH检测结果 阳性 的患 FISH技术在泌尿系统肿瘤研究方面 的应用价值正 日益 者被作者称为 “预期阳性患者”，这类患者 的肿瘤复发时间较 受到人们