新 疆葡萄树伤流液多糖的分离纯化及其抗氧化活性分析-isolation, purification and antioxidant activity analysis of polysaccharides from grape sap in xinjiang.docxVIP

中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文全名DEAEDiethylaminoethyl二乙基氨基乙基纤维素GCGas Chromatography气相色谱GBSKgrapevine bleeding sap from Kashigar喀什葡萄树伤流液GBSTgrapevine bleeding sap from Turpan吐鲁番葡萄树伤流液IRInfrared spectroscopy红外光谱SephadexSephadex葡聚糖凝胶UV-visUltraviolet and visible spectrophotometry紫外-可见分光光度法目录摘要………………………………………………………………………………… 1ABSTRACT……………………………………………………………………… 2前言………………………………………………………………………………… 4研究内容…………………………………………………………………………… 61. 新疆葡萄树伤流液中多糖含量测定………………………………………….. 62. 葡萄树伤流液粗多糖的制备……………………………………………………93. 葡萄树伤流液多糖的分离纯化………………………………………………. 154. 初步结构分析…………………………………………………………………. 215. 葡萄树伤流液多糖抗氧化活性研究…………………………………………. 36小结………………………………………………………………………………… 43致谢……………………………………………………………………………….. 45参考文献…………………………………………………………………………… 46综述……………………………………………………………………………….. 49攻读硕士学位期间发表的学位论文……………………………………………… 59导师评阅表………………………………………………………………………… 60新疆葡萄树伤流液多糖的分离纯化及其抗氧化活性研究 摘要目的：比较新疆葡萄树伤流液多糖含量及分离纯化葡萄树伤流液多糖，初步分 析结构并测定其抗氧化活性。方法：1.采用蒽酮-硫酸法比较多糖含量；2.利用醇沉法、 改进的 Sevage 法制备粗多糖；3.经过 DEAE-52、SephadexG-150 对粗多糖进行分离 纯化；4.研究多糖组分的理化性质，采用气相色谱法分析单糖组成，并用 UV、IR 法 进行初步结构分析；5.以羟自由基、氧自由基、DPPH 自由基、亚硝基自由基、ABTS 自由基为指标检测多糖组分及原液的抗氧化能力。结果：1.阿图什木纳格伤流液中多 糖含量最高为 816μg·mL-1，吐鲁番马奶子伤流液中多糖含量最低为 18.3μg·mL-1；2. 确定葡萄树伤流液多糖的制备条件为：20%醇沉除杂质、80%醇沉得粗多糖、改进的 Sevage 法除蛋白；3.喀什和吐鲁番葡萄树伤流液粗多糖经过 DEAE-52 分离分别得到8 个多糖组分；两地各 4 个多糖组分经过 SephadexG-150 纯化后，其洗脱峰均为单峰， 分子量在 1.4×104－1×105 之间；4.多糖组分均不含核酸和蛋白质，都具有多糖的特征 吸收峰；通过 GC 分析得出 GBSK-3 的单糖组成较简单，主要由木糖组成；多糖 GBST-5 由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成；多糖 GBSK-2，GBSK-5，GBST-3 的单糖组成相似主要由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成；多糖 GBSK-1，GBST-1，GBST-2 的单糖组成相似主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露 糖、葡萄糖、半乳糖组成。5.各组多糖都具有不同程度的抗氧化活性，对羟自由基清 除能力强于对其它四种自由基清除能力。结论：1.葡萄树伤流液中的多糖含量不仅产 地之间有差异还品种之间也有明显的差异；2.采用 DEAE-52 纤维素和 SephadexG-150 对葡萄树伤流液多糖进行分离纯化，得到了较好的分离效果，说明此方法适合分离 纯化葡萄树伤流液多糖。3.喀什和吐鲁番葡萄树伤流液多糖组分的分子量、红外光谱 信息、单糖组成均存在一定的差异，这印证了其在生物活性上的差异。4.葡萄树伤流 液多糖均具有一定程度的抗氧化活性，尤其对羟自由基活性最强，此性质跟原液一 致。关键词：葡萄树伤流液，多糖，分离纯化，抗氧化活性研究1Xinjiang grapevine bleeding sap polysaccharides separation, purification and study on their antioxidant activitiesABSTRACTObjective: Extract, purify polysaccharide