RP┐HPLC法同时测定大鼠血中甘草甜素和甘草次酸.docVIP

　　RP┐HPLC法同时测定大鼠血中甘草甜素和甘草次酸 作者：王骊丽 ，任平，黄熙 ，张莉 ，黄敬群 ，陈建宗 ，陈晓莉 【关键词】 甘草甜素 　　关键词: 甘草甜素;甘草次酸;色谱法，高压液相;血浆 　　摘 要:目的 建立一个同时测定甘草甜素、甘草次酸血浆浓度变化监测的方法，进一步用于“脾主药动学”假说的验证. 方法 采用内标定量的反相高效液相色谱法，以甲醇-水-醋酸（8811∶1）为流动相，ODS-3柱（150mm×4.6mm，5μm）为固定相，在紫外250nm检测. 结果 GL，GA在此线性范围内，线性关系良好、精密度较高. 结论 本方法具有简便、灵敏、快速而准确的特点，适用于注射GL制剂或口服中药复方前后GL和GA的体内、体外的药代动力学研究，为进一步进行中药复方的药物监测奠定了基础. 　　Keywords:glycyrrhizin;glycyrrhetinic acid;chromatogra-phy，high pressure liquid;plasma 　　Abstract:AIM Establishment of method for measuring plasma concentration of the glycyrrhizin and glycyrrhetinic acid simultaneously by RP-HPLC，in order to testify the hy-pothesis of pharmacokinetics by traditional Chinese medicine.METHODS RP-HPLC with internal labeling was employed.Methanol-H2 O-acetic acid（8811∶1）was used as mobile phase and ODS-3（150mm×4.6mm，5μm）column as fixed phase，and detected by UV（λ=250nm）.RESULTS With-in the linear range the glycyrrhizin and glycyrrhetinic acid showed good linear relation and were detected with high pre┐cision.CONCLUSION Method is characterized by high sim-plicity，rapidity，and sensitivity，and is suitable for the in vit-ro and in vivo pharmacokinetic study of glycyrrhizin and gly-cyrrhetinic acid after oral administration or injection of GL extracts. 　　0 引言 　　四君子汤为治疗脾虚证的经典名方，其主要成分之一为甘草甜素（glycyrrhizin，GL），在体内主要是以其代谢物甘草次酸（glycyrrhetinic acid，GA）的形式被吸收，分布到各个组织器官，最终以GA的形式排出体外［1］ .甘草甜素和四君子汤被我们用作验证“脾主药动学”假说［2，3］ 的主要工具方.关于制剂和大鼠血中GL，GA测定的HPLC法已见报道［4-7］ ，在我室以前甘草甜素血药浓度测定（待发表）的基础上，为进一步验证假说的可靠性及其进行方剂治疗药物监测［8-10］ 可能性，同时测定甘草甜素及其代谢产物GA的血药浓度是十分必要的.由此经过反复实验，建立了同时测定GL和GA的反相HPLC法.其结果快速、准确、重现性好，可用于注射GL制剂或口服中药复方前后的GL和GA药物动力学研究. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　美国Waters公司产HPLC系统（600泵，996二极管阵列检测器，7725手动进样器），M32 色谱工作站，Digital计算机;TGL-16台式离心机（上海医用分析仪器厂）.甘草酸铵（中国药品生物制品检定所）;联苯、甲醇等试剂为分析纯（西安化学试剂厂）.雄性Wistar大鼠5只，体质量（200±10）g，（12.0±1.5）wk龄（本校实验动物中心提供）. 　　1.2 方法 　　1.2.1 色谱条件 　　色谱柱C18 柱（Intersil:ODS-3，150mm×4.6mm，5μm）;流动相:甲醇-水-醋酸=8811∶1，流速:qv=1.0mL#12539;min-1 ，检测波长:λ=250nm;进样量为20μL. 　　1.2.2 对照品溶液 　　分别称取甘草酸铵、甘草次酸对照品4.10mg，4.10mg，各