环孢素aph敏感性纳米粒药代动力学研究.pdfVIP

环孢素A-pH敏感性纳米粒的药代动力学研究 中文提要 中文提要 A-loaded 目的本文制备环孢素八巾H敏感性纳米粒(eyelosporinepH-sensitive nanoparticles，CyA-NP)及其冻干粉末(Freeze-dried 剂的体内生物样品中cyA的药物浓度，旨在研究CyA-NP在体内的吸收、分布、代 谢和排泄，为其进一步研究与开发提供科学依据。 制备CyA-NP，通过真空冷冻干燥法制备其冻干粉末制剂。透射电镜观察纳米粒的表 面形态；动态激光散射法测定平均粒径与粒度分布；HPLC法测定两种纳米粒制剂的 包封率和载药量。(2)小鼠血液及各组织中CyA含量HPLC测定方法的建立及 CyA-NP的组织分布及靶向性研究：以市售新山地明微乳制剂(Neoral)为参比制剂， 小鼠单剂量灌胃给予两种制剂，采用液一液萃取法处理生物样品，环孢素 D(cyclosporineD。CyD)为内标，HPLC法测定血液和各组织中药物浓度，以药动学参 含量HPLC测定方法的建立及Fd_CyA加的药代动力学研究：以双周期交叉随机试 时间段收集尿样及粪样，液一液萃取处理，正离子检测模式下，选择离子 HPLC-MS／MS法测定样品中CyA含量，并根据代谢产物的相对分子质量及质谱行为， 的体外酶促动力学研究：差速离心法制备大鼠肝微粒体，Lowry法测定肝微粒体蛋白 浓度，考察孵育时间、酶浓度和底物浓度对药物代谢速率的影响，并根据 Lineweave-Brurk双倒数曲线，计算酶促动力学参数。 nln。 nm、52．7+4．6 结果(1)CyA-NP和Fd．．CyA姗的平均粒径分别为43．9士o．8 则的圆球形。(2)小鼠血液及组织中CyA含量HPLC测定方法的回收率均大于72％， 日内、日间精密度良好，该方法符合生物样品分析的要求。经3P97软件拟合，两种 制剂在小鼠体内药代动力学均符合口服吸收二室模型，CyA-NP的相对生物利用度为 中文提要 环孢素A呻H敏感性纳米粒的药代动力学研究 ～定的肾脏和心脏趋向性，在肝脏中无蓄积。(3)犬血液中CyA含量HPLC测定方法 的回收率均大于94％，日内、日间精密度均小于10％，该方法符合生物样品分析的 要求。经3P97软件拟合，两种制剂的药代动力学过程均符合二室模型。与Neoral相 80％，日内及日间精密度小于8％，准确度在士15％范围内。口服给药84h后，在尿液 到甲基化、羟基化和二羟基化代谢产物共七种，而尿样中有六种。(5)大鼠肝微粒体 中CyA含量HPLC测定方法的回收率大于87％，日内、日间精密度均小于10％，该 方法符合生物样品分析的要求。肝内清除率(C厶m)比较，原料药组要大于CyA-NP组 min后， (Po．05)，而最大反应速率(‰x)和米氏常数(磊，m)无明显差异(Po．05)。孵育90 原料药组药物代谢率(1．049-a：0．028pg·mL-1)高于CyA-NP(O．874+0．023gg·mL-1) (PO．05)。 便、重现性好，适用于生物样品中CyA浓度检测及药代动力学研究。CyA-NP体内 组织分布及代谢广泛，促进了药物口服吸收，显著提高了CyA的生物利用度。研究 结果显示，这种新型pH敏感性纳米药物输送系统具有良好的开发应用前景。 关键词：环孢素A；纳米粒；药代动力学；HPLC-MS／MS；组织分布 作 者：房志刚 指导教师：张学农 Ⅱ Pharmacokinetics A-loaded