sf-1和smad3相互作用促进小鼠颗粒细胞中cyp19a1的表达-interaction between sf - 1 and smad 3 promotes cyp 19 a1 expression in mouse granulosa cells.docxVIP

第1章绪论1.1卵泡发育的过程卵泡发生起始于卵巢内皮层，是由原始卵泡发育成初级卵泡，次级卵泡，三级卵泡和成熟卵泡的生理过程（图1.1）。这个过程中卵泡形态发生变化，功能分化。原始卵泡，初级卵泡，刺激卵泡统称为腔前卵泡。三级卵泡，格拉夫卵泡，成熟卵泡统称为有腔卵泡。修改自K.L.HulletalReviewsofReproduction(2000)5,175–182图1.1卵泡发育的生理过程原始卵泡由一个初级卵母细胞和包围在其周围的一层纺锤状原始颗粒细胞组成，颗粒细胞呈极性分布于卵母细胞周围，将卵母细胞与基膜分开。大量原始卵泡形成后聚集在卵巢皮质部位，形成原始卵泡库。最先形成的原始卵泡最早启动生长，并向卵巢髓质部位迁移，卵泡的分布定型尤其内在的机制。原始卵泡启动生长之后，原始颗粒细胞由扁平变为高柱或立方状，包围一个卵母细胞形成初级卵泡。这个阶段的主要事件是卵泡刺激素（Folliclestimulatinghormone，简称FSH）受体的表达，卵母细胞的生长分化以及卵母细胞和颗粒细胞间间隙连接的形成。FSH受体表达在颗粒细胞中，在初级卵泡发育阶段，FSH起一定的促进作用，但不是必需的。卵泡生长启动受基因的控制，但对具体的控制因子还不清楚。初级卵泡发育过程中卵母细胞的主要变化是体积的增大，直径从25μm增加至120μm，这样大的变化是卵母细胞基因组激活的结果，研究发现成熟过程的各个阶段总共有1000个特异表达的基因，但是并没有逐个的进行基因功能检测，因此不能确定各个阶段中起关键作用的基因。最重要的是高水平表达的生长分化因子-9（GDF-9）和骨形态发生蛋白-15（BMP-15）(Vittetal.,2000)。间隙连接通过连接蛋白进行小分子物质的交换，启动颗粒细胞与卵母细胞之间的营养调节与信号传递。次级卵泡阶段主要事件是卵泡结构发生变化，包括颗粒细胞数目的增多和卵泡膜细胞的生成。卵泡募集之后，颗粒细胞之间通过表达连接蛋白43（Cx43）形成间隙连接。膜细胞由基膜周围几层基质细胞样的细胞发育而来，表达的骨形态发生蛋白-4作为分化的膜细胞的功能性标记，伴随小血管的生成，可以向卵泡输入血液中的营养物质和促性腺激素以及输出代谢废物。颗粒细胞表达FSH受体和膜细胞表达促黄体生成素（LH）受体是卵泡发育越过腔前阶段的关键性事件。三级卵泡的标志性事件是卵泡腔和卵丘的形成。卵泡腔中充满卵泡液，是血浆的渗出液，作为颗粒细胞和卵母细胞的调控与被调控的一个微环境。随着卵泡腔的增大，卵母细胞被一团分化的颗粒细胞包裹形成突出于卵泡腔中的半岛，称作卵丘。卵母细胞与卵丘颗粒细胞统称为卵丘复合体。颗粒细胞产生的kit配基和卵母细胞间隙连接蛋白Cx37对卵泡腔的形成是必需的。同时雌激素分泌量增加刺进FSH受体增加。在三级卵泡进一步发育至成熟前的卵泡称为格拉夫卵泡(Simonetal.,2006)。卵泡发育至最大体积时，卵泡壁变薄，卵泡液体积最大，称为成熟卵泡或排卵前卵泡。这个时期的卵泡体积变化呈级数增长，绝对依赖促性腺激素的分泌。1.2卵泡发育进程中的主要事件一般来说，卵泡的发育过程始于原始卵泡的募集，经历腔前卵泡的发育，到有腔卵泡的选择和生长，止于卵泡的闭锁。卵泡的募集分为启动募集和周期募集，启动募集是指原始卵泡脱离抑制进入生长，周期募集是指已启动募集的卵泡应答激素加快生长。区别两种募集的关键点在于是否以促性腺激素峰作为启动信号。优势卵泡的选择和发育过程中，FSH和LH共同作用，血清中FSH的浓度以及卵泡对FSH的敏感性是FSH对优势卵泡选择的标准。大卵泡一方面产生抑素来降低FSH分泌水平，另一方面由于大卵泡中雌激素含量增加，从而上调细胞上FSH受体的含量。这样，尽管血液循环中FSH水平下降，其他小卵泡由于得不到足够FSH刺激而闭锁，但由于大卵泡中有足够多的FSH受体，因此能够获得足够的促性腺激素的刺激而继续发育。FSH直接刺激颗粒细胞增殖，由于颗粒细胞表达有FSH的受体，所以优势卵泡对FSH敏感性增加。随着优势卵泡的生长，颗粒细胞产生大量雌二醇，是由FSH和LH共同作用的结果(Channingetal.,1980)。卵泡闭锁的主要特征是：颗粒细胞产生雌激素减少，雌激素受体减少，孕酮增加，IGF结合蛋白表达增强。卵母细胞减数分裂发生两次阻滞，第一次是卵泡发育初期形成原始卵泡阶段，可能由于卵泡体细胞内某些物质合成受阻从而影响到卵母细胞内相关周期蛋白的合成。卵母细胞获得减数分裂能力之后的第二次阻滞与卵泡体细胞的旁分泌相关，体外壁颗粒细胞加卵母细胞培养，膜细胞加卵母细胞培养，或者培养壁颗粒细胞和膜细胞的培养液加卵母细胞培养，都能抑制卵母细胞成熟。这说明，某些来自壁颗粒细胞和膜细胞的分泌物是卵母细胞成熟的抑制因子。目前推测主要有以下几种：卵母细胞成熟抑制因子（OMI）、