抑癌蛋白ubiad1的细胞亚定位以及它与h-ras apoe的相互作用的研究-study on subcellular localization of anti-cancer protein ubi ad1 and its interaction with h - ras apoe.docxVIP

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2018-06-04 发布于上海
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抑癌蛋白ubiad1的细胞亚定位以及它与h-ras apoe的相互作用的研究-study on subcellular localization of anti-cancer protein ubi ad1 and its interaction with h - ras apoe

AbstractTERE1(Transitionalepithelialresponsegene1)wasfoundandclonedthefirsttimebyTerenceWMcGarveyetalin2001.DuetothefactthatTERE1containingtheUbiAprenyltransferasedomaincontaining1,TERE1isalsocalledUBIAD1.UBIAD1geneisubiquitouslyexpressedinnormalhumantissues.TheopenreadingframeofUBIAD1geneencodea8-10timesα-helicaltransmembraneproteinof36.8KDand338aminoacids.UBIAD1geneisrelatedwithmanyhumandiseases,suchastransitionalcellcarcinomaofthebladder,SchnydercrystallinecornealdystrophyandParkinson’sdisease.However,untilnowpeoplehaven’tknowntheroleofUBIAD1geneinthesediseasesyet,whichmaybeduetothedifferencesunderstandingoftheUBIAD1proteinsubcellularlocalization.Inourstudy,wefindtheUBIAD1proteinlocatedontheERandGolgiapparatus,butnotonthemembrane.AndwefindtheproteinUBIAD1isenrichedinGolgiisolatedfromL02cells.AfterthesubcellularlocalizationofUBIAD1isidentified,webegantostudyitsfunction.WeobservedtheproteinUBIAD1,ApoEandH-RasarecolocalizedontheGolgiapparatus.Andweobservedthefluorescenceresonanceenergytransformationphenomenonamongthethreeproteins.InCo-Immunoprecipitationexperiments,weobservedtheUBIAD1proteincaninteractrespectlywithApoEandH-Ras,respectly.WealsoobservedthatApoEcaninduceapoptosisofbladdercarcinomaT24cells,whichindicatestheproteincomplex,ApoE-UBIAD1-H-Ras,caninduceapoptosisoftumorcells.Keywords:UBIAD1,H-Ras,ApoE,subcellularlocalization,protein-proteininteraction,bladdercarcinoma目录摘要IAbstractII1绪论1.1抑癌基因UBIAD1的国内外研究现状(1)1.2Ras蛋白及其翻译后修饰(9)1.3载脂蛋白E(16)1.4本文的研究背景、目的及意义(17)2UBIAD1蛋白细胞内亚定位的研究2.1前言(19)2.2材料和方法(20)2.3实验结果(32)2.4讨论(37)3.UBIAD1蛋白与H-Ras以及ApoE相互作用的研究3.1前言(39)3.2材料方法(39)3.3实验结果(42)3.4讨论(49)4总结与展望(51)致谢(54)参考文献(55)附录1攻读学位期间发表论文(65)附录2攻读学位期间发表会议论文(66)附录3主要英文缩略词(67)1绪论1.1抑癌基因UBIAD1的国内外研究现状UBIAD1基因简介移行上皮反应基因TERE1（Transitionalepithelialresponsegene1）是由TerenceWMcGarvey等人于2001年首次发现并克隆的[1]。他们通过RT-PCR技术发现TERE1基因在正常的膀胱上皮组织和肌层浸润性TCC（Transitionalcellcarcinomaofthebladder）中的表达存在显著的差异。TERE1基因能够广泛表达于人类各组织中，如肺、骨骼肌、心脏、肝脏、肾脏、大脑、胎盘、胰脏、脾脏、睾丸、卵巢、胸腺、前列腺、小肠、结肠和膀胱等，KimieNakagawa等人在小鼠中检测TER