分子生物学常用实验技术概述课件.pptVIP

核酸杂交(nucleic acid hybridization) DNA的变性(Denaturation) ：维持双螺旋稳定性的氢键和疏水键的断裂，DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象 复性：变性DNA 在适当条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象。 核酸分子杂交：指具有一定互补序列不同来源的两条核酸单链（DNA或RNA），在一定条件下按碱基互补配对原则经过退火处理，形成异源双链的过程 。 核酸杂交 核酸杂交探针(probe)：能够与靶分子核酸按碱基互补原则特异性相互作用的一段已知序列的寡核苷酸或核酸。 Southern blot: 通过限制性核酸内切酶降解样本中DNA，再经凝胶电泳分离、转印到固相支持物上，用探针（DNA/DNA杂交）进行检测的方法 。用于基因组DNA特异性序列定位、检测目标DNA。 Northern blot: 应用DNA探针检测特异mRNA的一种杂交技术。用于研究特异性mRNA分子在细胞处于不同条件下发生量和质的变化，或不同组织器官中基因表达的差异。 Southern blot 蛋白质印迹-Western blot 将蛋白质电泳、印迹、免疫测定融为一体的特异性蛋白质检测方法 将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)，对不同分子量的蛋白质进行分离，再将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF 膜）