哺乳动物内质网体和细胞核中亲免卵白的研究.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 本文分为两个部分：第一部分是对哺乳动物内质网体中FKBP23与BiP特 异性结合及活性方面的研究；第二部分是对哺乳动物细胞核中hCyP33与mRNA 特异性结合及活性方面的研究。 第一部分研究的FKBP23属于亲免蛋白家族成员。亲免蛋白具有两大主要 特征：一是遗传上的保守性，二是肽脯氨酰顺反异构酶(PPlase)活性。另一个 蛋白质BiP则是Hsp70家族在内质网体中的成员，在生命体中，蛋白质在其生 理位置需折叠成具有正常生理功能的空间结构才具有活性。Hsp70家族蛋白在生 物体内的主要功能是蛋白质在细胞内亚细胞结构间的转运过程及其折叠过程 中，充当分子伴侣的角色，使蛋白质在其生理位置上能够折叠成具有正常生理 功能的空间结构并具有活性。 在此部分中我们通过免疫沉淀的方法证明了在小鼠内质网体中mFKBP23 与mBiP特异性地结合并且这种结合也是受Ca”浓度的调控，结合与解离的突变 点也在2—3ram之间，与先前体外结论～致。为了更加具体地确定FKBP23与 BiP的结合位点，我们分段克隆了这两种蛋白的N端和C端蛋白，并通过亲和 们还采用了丙酮酸激酶．乳酸脱氢酶偶联酶法证明了只有结合的mFKBP23，而不 本文的第二部分研究的是一种在人T细胞核内发现的亲环素类蛋白，亲环 素类蛋白是一类普遍存在于原核、真核生物和多种亚细胞结构中的蛋白，因具 有肽脯氨酰顺反异构酶活性，在新生肽链的折叠、输送和生物大分子的组装过 程中起关键作用。从结构上看，hCyP33包含两个功能区域：一个N端的RNA 结合区域，一个c端的肽脯氨酰顺反异构酶区域。 中文摘要 mRNA结合蛋白，并作为功能蛋白有可能参与T细胞核内RNA的输送过程或与 转录有关的信息传递过程。 关键词： FKBP23BiP mRNA ATPase活性人亲环素33 PPIase活性 n Abstract Abstract T1lisdissertationis oftwo first the binding composedparts：thepartinvestigated betweenFKBP23andBiPinmammalian reticulumandthe specificity endoplasmic influenceofthe toBiPATPase secondofthisdissertation binding activity．Thepart andmRNAmammalian studiedthe between in specificity karyon binding hCyP33 the to andinfluenceofthe PPIase bindinghCyP33 activity． FKBP23studiedinthefirst isamemberofimmtmophilinfamily． part and the conserved