纳米金生物探针及硫化铜膜在生物传感器中的一些利用.pdfVIP

中文摘要 纳米粒子由于其特有的性质及巨大应用前景，已成为科学研究的 热点。近年来，纳米技术逐步进入生物传感器领域，为生物传感器的 发展提供了无穷的想象。总的说来，纳米颗粒可以广泛地应用于敏感 分子的固定，信号的检测和放大，待测物质的富集和浓缩。本文首先 研究了利用金纳米粒子标记寡核苷酸和羊抗人免疫球蛋白G(IgG) 生物探针分别检测了单碱基突变和人IgG，最后研究了基于硫化铜纳 米膜的电容型免疫传感器。具体内容包括以下几个方面： 第一部分：提出了一种基于自组装和使用金标抗体和络合物双重 放大检测信号的方法提高压电免疫传感器的灵敏度。通过自组装方法 在石英晶体微天平(QCM)的金电极表面组装一层葡萄糖球菌蛋白A (PA)，再在生成的膜上面组装一层羊抗人IgG充当传感界面。在传 感界面与人IgG反应后，分别利用金标抗体和免疫络合物作为一级放 大标记物和二级放大标记物双重放大人IgG的检测信号。为了提高灵 敏度，对络合物的组成和金标抗体的稀释倍数进行了优化。实验结果 表明该传感器能在10．9 ng／mL～10．9gg／mL范围内对人IgG进行测 定。与传统的压电免疫分析比较，这种质量放大方法的灵敏度和检测 下限均有较大提高。 第二部分：设计一锁挂探针检测结直肠癌相关的K一碎片基因密 码子12的单碱基突变。只有与目标链完全匹配时，锁挂探针才能被 大肠杆菌连接酶连接。环化的锁挂探针和用引物与之杂交后，通过 ①29聚合酶延伸引物得到由与锁挂探针互补的碱基单元组成的DNA 单链，最后利用13nm纳米金颗粒标记的巯基化寡核苷酸与RCA产 物杂交后，通过溶液吸光度的变化检测目标链上密码子12的突变。 第三部分：本部分提出了一种通过逐步组装的方法在金电极上构 建硫化铜膜，制备了金属／绝缘层／识别层型的电容型免疫传感器。硫 化铜膜的表征实验表明通过逐步组装可以获得绝缘、超薄且厚度可控 的硫化铜膜。当以人免疫球蛋白A为分析待测物时，在1．81 ng／mL 90．5 ng／mL浓度范围内可以获得良好的线性关系，检测限可达0．905 ng／mL，而且该传感器有着良好的再生性能。 关键词：纳米金标记寡核苷酸；免疫络合物；葡萄糖球菌蛋白A；压 电免疫传感器：电容型免疫传感器，硫化铜膜 II ABSTRACT have becomeone Nanoparticles ofthe research appealing fields， totheir andtheir owing manypeculiar property great hightechnology been appliedprospect．Recentlyhas intothefield nanotechnique applied of biosensorand the ofbiosensorwiththe providesdevelopment infinite have prospect．In beenusedto sum，nanopar