不同运动负荷对大鼠心肌超微结构及一氧化氮与一氧化氮合酶影响.docVIP

不同运动负荷对大鼠心肌超微结构及一氧化氮与一氧化氮合酶影响 　　摘要：目的：采用大鼠8周递增负荷游泳训练模型，探讨不同负荷运动对大鼠心肌超微结构的影响，以及引起心肌、血清中NO、NOS变化的原因。方法：纯种健康雄性SD大鼠36只，按体重随机分为对照组、适宜负荷组、过度负荷组，观察8周游泳训练后大鼠心肌超微结构及心肌、血清中NO、NOS的变化。结论：1) 不同负荷的游泳训练可以提高大鼠心肌、血清中NO的含量；2) 适宜负荷的游泳训练可以提高大鼠心肌、血清中cNOS活性，改善大鼠心肌超微结构，提高心血管系统的功能，推测适宜负荷的游泳训练提高大鼠心肌、血清中cNOS的活性可能有利于大鼠心肌超微结构的改善；3) 长时间过度负荷的游泳训练可以使大鼠心肌、血清中iNOS活性升高，大鼠心肌超微结构损伤，使心血管系统功能下降，推测过度负荷的游泳训练引起的大鼠心肌超微结构损伤可能与大鼠心肌、血清中iNOS活性的升高有关。 　　关键词：递增负荷；鼠；一氧化氮；一氧化氮合酶；心肌超微结构 　　中图分类号：G804.2文献标识码：a文章编号：1007-3612(2008)07-0936-03 　　 　　目前有关运动对一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）的影响已有部分研究成果，但关于不同运动负荷对心肌超微结构、心肌和血清中NO、NOS影响的研究尚未见系统报道。本文采用大鼠8周递增负荷游泳训练模型，观察不同运动负荷时大鼠心肌超微结构和心肌、血清中NO、NOS的变化，探讨不同负荷运动对大鼠心肌超微结构的作用，以及引起大鼠心肌、血清中NO、NOS变化的原因，从而为探讨心脏对运动训练发生适应性变化的机制提供实验依据。 　　 　　1研究对象与方法 　　 　　1.1研究对象 　　纯种健康雄性SD大鼠36只，按体重随机分为对照组（n=12）、适宜负荷组（n=12）、过度负荷组(n=12)。分笼饲养，每笼6只。饲养温度21～24℃，湿度44％～55％，国家标准啮齿类动物饲料喂养，自由饮水进食，并记录每天饮食情况。 　　1.2研究方法 　　1.2.1运动条件游泳池100 cm×60 cm×70 cm，水深超过大鼠身长的2倍，水温31～32℃。 　　1.2.2运动方案参照北京医科大学运动医学研究所朱全等建立的大鼠过度训练模型［1］???本实验建立了大鼠递增负荷游泳训练模型：1） 对照组：平时不运动，饲养条件与运动训练组相同。大鼠开始正式训练前，每天先适应性游15 min，3 d后开始正式训练。2） 适宜负荷组：正式训练时，每周训练5 d，每天1次。第一次游20 min，以后逐日增加游泳时间。第一周末时每次游半小时，第二周末时每次游1 h，第三周末时每次游2 h。从第四周开始强度不再增加，保持到实验结束。 　　3） 过度负荷组：前三周过度负荷组和适宜负荷组训练完全相同，第四周起开始高强度训练。第四周开始时在过度负荷组大鼠尾部负0.5％体重的重物，每天游2 h。第四周末时负重增加至体重的1％，第五周末时增加至体重的1.5％，第六周末时增加至体重的2％，从第七周开始增加训练次数，每天上午训练一次，负2％～3％体重游2 h，下午训练一次，负3％～6%体重游1～1.5 h，直至训练结束。如有力竭表现（力竭标准为没入水中10 s不能浮出水面），捞出水面休息5 min后继续训练至完成训练任务。训练时间共8周。 　　1.3取材大鼠末次游泳训练后24 h，称重，断头处死，取血，分离血清备用。迅速解剖大鼠，取左心室，在冰生理盐水中浸泡，洗取残血，滤纸吸干水分，部分心肌组织用生理盐水制成10％匀浆，低温离心，取上清液备用；部分心肌组织用于制备电镜照片。 　　1.4指标测试NO、NOS测定：NO采用硝酸还原酶法，NOS采用比色法，匀浆上清液蛋白质采用考马斯亮兰法，试剂盒购于南京建成生物工程研究所，所有测定均按试剂说明进行。 　　心肌电镜照片：由湖南医科大学电镜实验室拍摄。 　　1.5结果处理全部数据均以均数±标准差（X±SD）表示。数理统计采用国际通用统计软件SPSS11.0 for Windows的t检验，显著性水平取P 　　由此可见，搏动性血流和血管剪切应力增强、血液NE、Ach、BK生成增加、炎性细胞因子增多及心血管系统L-Arg跨膜转运能力增强都可使NO合成增加。 　　3.2不同负荷游泳训练对大鼠心肌、血清中NOS活性的影响 　　3.2.1不同负荷游泳训练对大鼠心肌、血清中cNOS活性的影响本实验结果表明适宜负荷的游泳训练可以使大鼠心肌、血清中cNOS活性升高。有研究表明［3］，cNOS活性需Ca2+/CaM存在，受Ca2+浓度调节，当Ca2+/CaM复合物与cNOS结合时，导致此酶激活。任何能引起Ca2+进入细胞内的因素