基于荧光共振光散射法检测bsactmab-detection of bsactmab based on fluorescence resonance light scattering method.docxVIP

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2018-08-14 发布于上海
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基于荧光共振光散射法检测bsactmab-detection of bsactmab based on fluorescence resonance light scattering method.docx

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基于荧光共振光散射法检测bsactmab-detection of bsactmab based on fluorescence resonance light scattering method

摘要牛血清白蛋白(BSA)因其结构与人血清白蛋白十分相似，对牛血清白蛋白的测定进而应用于人血清白蛋白的研究是常见的研究方法。本文利用BSA在紫外灯照射条件下，溶液发生光致交联自缔合效应，基于此性质建立了一种运用共振光散射(RLS)技术定量测定BSA的方法；我们还研究了变色酸2R与BSA作用后形成复合分子，形成的复合物可猝灭变色酸2R-银纳米粒子体系的荧光强度，基于此性质建立了一种运用荧光分光光度技术定量测定BSA的方法；此外，我们研究了阳离子表面活性剂(CTMAB)与银纳米粒子结合后形成较大的聚集体，导致体系的RLS强度显著增加，基于此性质建立了一种运用RLS共振光散射技术定量测定CTMAB的方法。主要研究内容如下：?紫外灯照射BSA溶液，在一定浓度的BSA条件下，可形聚集体。且RLS信号在BSA浓度为0.5-10mg/L的范围内呈线性增强；并发现DNA与BSA共同作用时，RLS强度增强幅度增加，检测BSA的灵敏度更高，测定BSA的线性范围为：0.05-10mg/L，检出限可达0.01mg/L。将该法简单、快速。②利用BSA能猝灭变色酸2R-银纳米粒子体系的荧光强度，且其荧光猝灭程度与BSA的浓度在一定范围内呈线性相关。线性范围为:0.02-1.00mg/L，检出限为：0.26μg/L。③CTMAB与银纳米粒子作用生成的不溶性物质，使体系的共振光散射强度增强。其增强程度与CTMAB的浓度在一定范围内呈线性相关。线性范围为5.0?10-9-1.0?10-7mol/L,检出限为4.9?10-9mol/L。关键词：牛血清白蛋白；溴化十六烷基三甲基铵；变色酸2R；银纳米粒子；共振光散射光谱；荧光光谱ABSTRACTBovineSerumAlbumin(BSA)hasaverysimilarstructurewithHumanSerumAlbumin,thus,studyontheinteractionbetweenBSAandotherreagentcanlearntheinteractionbetweenHSAandotherreagent.AmethodforquantitativedeterminationofBSAhasbeendevelopedusingResonanceLight-scattering(RLS)techniqueunderexposingBSAtoultravioletlamp.Super-compoundedmoleculeformationfromtheinteractionbetweenchromotropicacid2RandBSAcanquenchthefluorescenceintensityofchromotropicacid2R-silvernanoparticlessystem.AmethodforquantitativedeterminationofBSAhasbeendevelopedusingFluorescenceSpectrophotometrytechnologybasingonthechangeofthefluorescenceintensities.Additionally,theinteractionsbetweensilvernanoparticlesandcationiccetyltrimethylammoniumbromide(CTMAB)werestudied.ItwasfoundthatsilvernanoparticlesaggregatedinthepresenceofCTMAB,asaresultofenhancementtheintensitiesofRLSofthesystem.Thus,amethodforquantitativedeterminationofCTMABhasbeendevelopedbyRLSTechnique.Themainresearchcontentsasfollows:①AnobviousproteinprecipitationcanbeformedwhenUltravioletlampirradiatestheBSAsolutionwithcertainconcentration.TheRLSsignalisalinearenhancementwiththeconcentrationofBSAintherangeof0.5-10mg/L.ItisfoundthattheintensityofRLSincreasedwhenDNAcombinedwithBSA.Asaresult,thesensitivitytodetermineBSAenhanced.ThelinearrangetomeasureBSAis0.05-10m