姜黄素对mcf-7细胞耐药的调控及作用机制的研究-study on the regulation and mechanism of curcumin on drug resistance of mcf - 7 cells.docxVIP

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2018-08-14 发布于上海
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姜黄素对mcf-7细胞耐药的调控及作用机制的研究-study on the regulation and mechanism of curcumin on drug resistance of mcf - 7 cells.docx

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姜黄素对mcf-7细胞耐药的调控及作用机制的研究-study on the regulation and mechanism of curcumin on drug resistance of mcf - 7 cells

英汉缩略语名词对照英文缩写英文名称中文名称human breast cancer cell line MichiganMCF-7cancer foundation-7人乳腺癌细胞系DOXdoxorubicin阿霉素3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxMTSymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-t etrazolium溴化噻唑蓝四氮唑MDR1multidrug resistance protein 1多耐药基因 1BSPbisulfite sequencing PCR亚硫酸氢盐测序法quantitative real-time polymerase chainRT-PCRreaction实时荧光定量聚合酶链反应FCMflow cytometic流式细胞术DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜PBSphosphate buffer saline磷酸盐缓冲液 PBSTphosphate buffered saline tween-20磷酸盐吐温缓冲液 BCAbicinchoninic acid二金鸡纳酸IC50half maximal inhibitory concentration半抑制浓度AZA5-azadeoxycytidine地西他滨SDS-PAG Esodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳PVDFpoly vinylidene fluoride偏聚氟乙烯ECLenhanced chemiluminescence reagents增强型化学发光试剂BSABovine serum albumin牛血清白蛋白1姜黄素对 MCF-7 细胞耐药的调控及作用机制的研究摘要目的研究姜黄素（ Curcumin ）对人乳腺癌阿霉素耐药细胞株 MCF-7/DOX 杀伤与耐药的影响及其作用机制，为姜黄素的临床应用提供新的实验依据。方法1 采用 MCF-7 细胞持续接触阿霉素的方法进行培养，逐步递增阿霉素的浓度，体外诱导建立阿霉素耐药细胞株 MCF-7/DOX。2 MTS 法测定姜黄素与阿霉素作用后 MCF-7/DOX 细胞生长抑制效应，流式细胞仪检测姜黄素对细胞内阿霉素水平的平均荧光强度。 3 RT-PCR 法检测两种细胞 MDR1 mRNA 表达水平，Western blot 法检测细胞 MDR1 蛋白的表达水平，BSP 法检测 MDR1 基因甲基化水平的变化。结果1 MTS 实验表明姜黄素处理 MCF-7、MCF-7/DOX 细胞后，两种2细胞的增殖均减弱，且细胞对阿霉素的敏感性显著增高。2 RT-PCR 结果显示姜黄素促进两种细胞 MDR1 mRNA 的表达， Western blot 结果显示姜黄素促进细胞 MDR1 蛋白的表达，流式细胞术结果表明姜黄素处理细胞后，细胞内阿霉素浓度较空白组降低。BSP 结果显示 MDR1 基因启动子（-251~+780）区域去甲基化作用明显。结论姜黄素能抑制肿瘤细胞的生长，增加细胞对阿霉素的敏感性，同时也促进耐药基因 MDR1 的表达。关键词：姜黄素，甲基化，MCF-7 细胞，MDR13EFFECT OF CURCUMIN ON THE DRUG-RESISTANCE IN MCF-7/DOX CELLS AND ITS MECHANISMABSTRACTObjectiveTo investigate the effect of cytotoxicity and drug resistance by curcumin and its mechanism in human breast cancer cell line MCF-7/DOX, and provide the experimental basis for the clinical application of curcumin.MethodsEstablish the doxorubicin-resistance MCF-7/DOX cell line by cultivate the MCF-7 cell line with gradually increasing concentration of doxorubicin in vitro.The suppression of cell growth of cells with doxorubicin, curcumin, doxorubicin combined with curcumin were evaluated by MTS a