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通腑宁颗粒对免疫法复制大鼠UC动物模型影响实验研究 　　摘　要：目的：研究通腑宁颗粒对慢性非特畀性溃疡性结肠炎的治疗作用。方法：通腑宁颗粒对免疫法复制大鼠溃疡性结肠炎动物模型的影响，来观察其治疗效果。结果：通腑宁颗粒对免疫法复制溃疡性结肠炎动物模型具有免疫调节作用。结论：通腑宁颗粒可通过调整免疫功能实现对慢性非特异性溃疡性结肠炎的治疗作用。 　　关键词：通腑宁颗粒；溃疡性结肠炎；免疫调节；实验研究 　　中图分类号：11285.5 　　文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2007)07－1325－02 　　 　　通腑宁颗粒原名为加味通腑汤，由胡黄连、黄柏、滑石、芦根、天花粉等13味中药组成，具有通调气血、清热利湿、通腑止泻功效。主治湿热型慢性非特异性溃疡性结肠炎，疗效满意。本方是笔者的临床经验方，自1991年起即在本院作为院内制剂使用，1999年在保持原方药物构成不变和??量配比不变的情况下，改剂型为颗粒剂，现已申报国家三类中药新药。 　　慢性非特异性溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)是一种原因不明的慢性非特异性炎症性肠病，临床上以腹痛、腹泻、黏液血便为主要症状。本病一般呈慢性迁延过程，常反复急性发作。我国近年发病率有显著增高趋势。原因不明，一般认为本病与免疫机制有关。在临床上本病可并发中毒性结肠扩张、肠穿孔、大出血、假性息肉、癌变；肠道外可并发关节炎、皮肤病变、眼病、肝胆病变、尿路结石、间质性肺纤维化、血栓栓塞症、动脉炎等。在治疗上目前西医多采用静脉营养法、抗生素、激素、免疫抑制剂、生物制剂等，但直至目前对本病的病因病理尚未明了，临床疗效尚不够理想。 　　中医学认为，UC属于“泄泻”、“痢疾”、“腹痛”等范畴，患者常由于先天禀赋不足，后天脾胃功能不健，在感受外邪，饮食所伤，情志不遂等致病因素作用下而诱发。目前认为其发病病机是脾虚为本，大肠湿热为标，血瘀为局部病理损害。为评价通腑宁颗粒的药理作用，进行了通腑宁颗粒对免疫法复制大鼠UC动物模型的影响实验。 　　 　　1 实验材料 　　 　　1．1 实验动物Wistar大鼠74只，雌、雄各半，体重150－220g；新西兰家兔4只。体重2－3kg。动物均由中国医科大学实验动物中心提供，合格证号辽实质合字第008号，辽实条合字第001号，试验前于辽宁省中医研究院动物观察室适应性饲养1周后使用，合格证号辽实条合字第016号。 　　动物饲料：鼠颗粒饲料、兔颗粒饲料，沈阳市于洪区前民饲料厂生产。 　　饲养环境：辽宁省中医药研究院动物饲养观察室，室内洁净，安静，自然采光，通风良好，湿温度适中。 　　饲养方法：按组分笼饲养，大鼠每笼5只，兔每笼2只，自由进食进水。 　　1.2 实验药物及试剂 通腑宁颗粒(辽宁省中医药研究院制剂室提供，批号990425，规格7.5g/袋)；香连化滞丸(包头中药厂生产，批号规格：6g/丸)；柳氮磺吡啶片(上海三维制药有限公司生产，批号：200011015，规格：250mg/片)；卡介苗(长春医学生物制品研究所，批号：200010003。规格：60mg/支)；无水羊毛脂(防化学院实验化工厂，批号：981101)；氟化钠(丹东市联合制冷剂厂，批号：950601)；硼砂(沈阳市制剂三厂，批号：991010)；硼酸(沈阳市制剂三厂，批号：991201)；PEG6000(防化学院实验化工厂，批号：950615)。 　　 　　2 实验方法 　　 　　取体重180－220g大鼠74只，雌雄各半，随机分为模型组(64只)和空白对照组(10只)，取4只家兔(雌雄不拘)，剖腹取全结肠，清水洗净后刮取肠黏膜，加20mL生理盐水，匀浆器匀浆后，离心30min(3000r/min)，取上清液。以上清液溶解卡介苗制成10mg/mL溶液。另取无水羊毛脂及液体石蜡，以3:5比例配成佐剂，高温高压灭菌后备用。取佐剂和黏膜上清液卡介苗溶液按1：1比例制成含卡介苗5mg/mL的黏膜匀浆，即抗原。冰箱冷藏。造型大鼠首次每只足跖酒精棉球局部消毒后注射抗原0.4mL，于第10、17、24、31天分别于足跖、背部、腹股沟、腹腔内每只动物以同样剂量注射，但末次注射不加佐剂。造型期间观察大鼠大便性状，厌食与否，毛发，活动状况等，造型时间为40天。从造型组中取4只大鼠，处死，取出结肠做病理学检查，确定造模成功。将造型大鼠随机分成6组，每组10只，分别为通腑宁颗粒高、中、低剂量组；香连化滞丸组；柳氮磺吡啶组；模型组。各组动物按表6的剂量灌胃给药。空白对照组与模型组则灌胃给予同体积生理盐水。连续灌胃给药3周，每天1次。实验结束时，禁食1天，大鼠摘眼球取血后脱颈处死，于距肛门5cm处剖取结肠组织，置10％甲醛溶液中固定。将进行组织