阿托伐他汀对肾血管性高血压大鼠心肌纤维化及CTGF表达影响.docVIP

阿托伐他汀对肾血管性高血压大鼠心肌纤维化及CTGF表达影响 　　摘要：目的 探讨阿托伐他汀对肾性高血压大鼠心肌纤维化以及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法 建立肾性高血压大鼠模型，将实验大鼠24只随机分为3组，每组8只，对照组、高血压组、阿托伐他汀组。术后4周末开始用阿托伐他汀50mg/(ks?d)连续灌胃8周。测量大鼠尾动脉收缩压，检测心肌胶原浓度、心肌总胶原容积分数(t－CVF)以及免疫组化检测心肌CTGF的表达。结果 高血压组尾动脉收缩压、心肌羟脯氨酸含量、t－CVF以及CTGF的表达显著高于对照组(P＜0.01)；阿托伐他汀组大鼠的心肌羟脯氨酸含量、t－CVF和CTGF的表达低于高血压组(P＜0.01)。结论 阿托伐他汀具有抑制心肌纤维化的作用，其机制可能与下调CTGF的表达有关。 　　关键词：肾性高血压大鼠；阿托伐他汀；心肌纤维化；结缔组织生长因子 　　中图分类号：R544.1　R255.3　文献标识码：A　文章编号：1672-1349(2007)12-1218-02 　　 　　心肌纤维化是高血压常见的严重并发症，其主要的病理改变为细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的大量聚集，心脏中ECM含量最多的是胶原，发生纤维化时胶原过度沉积，各型胶原含量增加、比例失调、空间位置重新排列，进而影响心脏舒缩功能，最终导致心力衰竭的发生。本实验旨在观察阿托伐他汀对肾血管性高血压大鼠心肌纤维化的抑制作用，并探讨其相关机制，为心肌纤维化的预防和治疗提供新的思路和手段。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1．1 动物造模及分组 采用二肾一夹(2K1C)经典造模法建立肾血管性高血压大鼠模型。健康雄性Wistar大鼠24只，体重180g～230g，由山西医科大学生理教研室提供。按随机法将24只大鼠随机分为高血压组、阿托伐他汀组、对照组，每组8只。用10％的水合氯醛0.3mL/100g腹腔麻醉，开腹，用内径0.25mm的银夹钳夹高血压组和阿托伐他汀组大鼠左侧肾动脉使其部分狭窄，对照组处理方法相同但不上银夹。术后4周测尾动脉收缩压(SBP)高于150mmHg(1mmHg=0.133kPa)者为高血压模型制备成功。术后4周末阿托伐他汀组用蒸馏水(1mL)溶解的阿托伐他汀灌胃50mg/(10?d)，高血压组和对照组则以等量的蒸馏水灌胃，连续灌胃8周后处死。 　　 　　1．2 检测指标及方法 　　1．2．1 收缩压测定 大鼠于40℃预热15min～20min后用RBP l型大鼠尾压心率测定仪(中日友好，临床医学研究所研制)测量大鼠清醒状态下尾动脉收缩压。 　　1．2．2 心肌胶原浓度(collagen concentration，Coll) 心脏内的胶原浓度通过测定羟脯氨酸含量表，纤维性胶原平均含13.4％的羟脯氨酸。通过样本碱水解法测定羟脯氨酸含量(试剂盒购自南京建成生物工程公司)，然后乘以羟脯氨酸含量系数7.46，算出胶原浓度。 　　1．2．3 胶原形态定性及定量分析 取左室中段横截面心肌组织，按常规固定，制片(4μm)后，行胶原特异性染色VG染色。在VG染色下，心肌细胞、红细胞呈黄色，胶原呈红色。应用HPlAS-2000型图像分析系统，通过灰度调节来区别胶原与非胶原，测量心肌总胶原容积分数(total,collagenvolumefraction，t-CVF)。 　　1．2．4　CTGF免疫组化染色(PV法) 免疫组化图像分析经标准灰度校正后，以平均灰度值表示CTGF含量，平均灰度值越低表示CTGF含量越高。 　　 　　1．3 统计学处理 用SPSS11.5进行统计学分析，所有数据以均数上标准差(x±s)表示，采用单因素方差分析和SNK-α检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 　　 　　2 结 果 　　 　　2．1 各组大鼠血压情况 3组大鼠手术前体重和基础血压差异无统计学意义。12周实验结束后时，对照组血压为(112.38±9.96)millHg较术前无明显变化，高血压组大鼠的收缩压为(178.78±16.87)mmHg显著高于对照组(P＜0.01)；阿托伐他汀组给予阿托伐他汀钙治疗后，血压略有下降为(165.50±17.98)mmHg，且与高血压组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 　　 　　2．2 心肌纤维化程度 t-CVF高血压组的心脏间质和血管周围胶原显著增加，并可见瘢痕灶，肌间隙中胶原增多，在VG染色下心肌细胞、红细胞呈黄色，胶原呈红色。分析显示高血压组与对照组比较，t-CVF显著增高(P＜0.01)，阿托伐他汀组较高血压组心脏间质和血管周围胶原均减少，未见明显瘢痕灶，其t-CVF降低(P＜0.01)，表明阿托伐他汀抑制了心肌纤维化的发展。心