生物化学与分子生物学-基因表达调控PPT.pptVIP

2、特异转录因子 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 SP1 CBF (特异转录因子) 转录激活因子：增强子结合蛋白 转录抑制因子：沉默子结合蛋白 阻遏基因 mRNA 阻遏蛋白 I DNA z y a O P pol 没有乳糖存在时 乳糖操纵子被阻遏蛋白封闭 阻遏蛋白四聚体与操纵基因结合，阻碍转录 Lac阻遏蛋白的作用---负调控 Lac阻遏蛋白 由基因I编码生成的蛋白质 结构特点 具有四级结构的蛋白质 具有4个相同亚基 每个亚基中都有一与诱导剂结合的位点 调控机制 （负调控） Lac阻遏物与O序列结合： 结构基因关闭 Lac阻遏物与诱导剂结合： 不与O序列结合，结构基因开放 阻遏蛋白对于O序列的结合并非是经久不变的，而是有一个10～20分钟的半衰期。 RNA聚合酶抓住这一时机进行一次转录，从而翻译出几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透性酶 Lac操纵子诱导剂 生理性诱导剂 别乳糖 实验常用诱导剂 异丙基硫代半乳糖（IPTG） mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 别乳糖 β-半乳糖苷酶 + + + + 转录 无葡萄糖（cAMP浓度高）时 有葡萄糖（cAMP浓度低）时 （三）CAP的正性调节 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP CAP有DNA结合区及cAMP结合位点 乳糖启动子－10区TATGTT序列，其中的G－C碱基对增加了双螺旋结构的稳定性，因此RNA聚合酶不足以使双链解开。 CAP－ cAMP复合物结合在乳糖操纵子的CAP结合位点上，使双螺旋结构的稳定性降低，促进了开放性启动子复合物的形成 如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性 当细菌在含有葡萄糖和乳糖的培养基中生长时，通常优先利用葡萄糖，而不利用乳糖 当葡萄糖耗尽后，才利用乳糖，这种葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏 葡萄糖能抑制腺苷酸环化酶活性，因而降低cAMP浓度 无葡萄糖，cAMP浓度高；有葡萄糖，cAMP浓度低 （四） 协调调节 mRNA 低半乳糖时 高半乳糖时 葡萄糖低 cAMP浓度高 葡萄糖高cAMP浓度低 RNA-pol O O O O Lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖存在又需缺乏葡萄糖 乳糖存在：阻遏蛋白与诱导剂结合不与O序列结合 缺乏葡萄糖： CAP- cAMP复合物结合在CAP结合位点 乳糖操纵子及其协调调节 Trp Trp 高时 Trp 低时 mRNA O P trpR 调节区 结构基因 RNA聚合酶 RNA聚合酶 色氨酸操纵子的作用原理 操纵子关闭 三、原核生物转录终止调节 两种主要转录终止机制 依赖Rho因子的转录终止 不依赖Rho因子的转录终止 两种终止调节方式 衰减：导致RNA链的过早终止 抗终止：阻止前者的发生，使下游基因得以表达 UUUU…… UUUU…… 调节区 结构基因 trpR O P 前导序列 衰减子区域 UUUU…… 前导mRNA 1 2 3 4 衰减子结构 第10、11密码子为trp密码子 终止密码子 14aa前导肽编码区: 包含序列1 形成发夹结构能力强弱： 序列1/2序列2/3序列3/4 trp 密码子 UUUU…… UUUU…… 3 4 UUUU 3’ 3 4 核糖体 前导肽 前导mRNA 当色氨酸浓度高时 转录衰减机制 1 2 5’ trp 密码子 衰减子结构 就是终止子 可使转录 前导DNA UUUU 3’ RNA聚合酶 终止 UUUU…… 3 4 2 4 2 3 UUUU…… 核糖体 前导肽 1 5’ trp 密码子 结构基因 前导DNA RNA聚合酶 当色氨酸浓度低时 Trp合成酶系相关 结构基因被转录 序列3、4不能形成衰减子结构 前导mRNA 四、原核生物翻译水平的调节 蛋白质分子的自我调节 调节蛋白结合mRNA靶位点，阻止核蛋白体识别翻译起始区。 调节蛋白一般作用于自身mRNA，抑制自身的合成，称为自我控制 2. 反义RNA对翻译的调节作用 与mRNA杂交阻断30S小亚基对起始密码子的识别及与SD序列的结合，抑制翻译起始。称为反义控制 自我调节（autogenous control）。 一、真核基因组结构特点 （一）真核基因组结构庞大 基因组 人 大肠杆菌 大小（bp) 3 × 10 9 4.6× 10 6 含基因(已确认） 40000(25000) 3000(1500) 编码蛋白质序列占比 1％ 大于50％ 其它特点 重复基因约