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高三一轮基因工程(优质课)PPT
选修三;2014一轮复习 基因工程 ;一、基因工程的原理及技术;2、技术:;一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(断开的不是氢键); 1、大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端。
2、SmaⅠ能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端 。;什么叫黏性末端?;什么叫平末端?; ;;连接酶的作用是:将互补配对的两个末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。
(恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键);DNA分子的切割和连接;DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点?;作用:将外源基因送入受体细胞
条件:
(1)能在宿主细胞内复制并稳定地保存
(2)具有一个或多个限制酶切点
(3)具有某些标记基因
(4)载体必须安全,不会对受体细胞有害
种类:质粒、噬菌体和动植物病毒
;1.细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子
2.质粒是基因工程中最常用的运载体
3.最常用的质粒是大肠杆菌的质粒
4.存在于许多细菌及酵母菌等生物中
5.质粒的存在对宿主细胞无影响
6.质粒的复制只能在宿主细胞内完成;;1.在基因工程中使用的限制性核酸内切酶,其作用是( )
A.将目的基因从染色体上切割出来
B.识别并切割特定的DNA核有酸序列
C.将目的基因与运载体结合
D.将目的基因导入受体细胞
2.基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( )
A.繁殖速度快
B.遗传物质相对较少
C.多为单细胞,操作简便
D. DNA为单链,变异少
;3.基因工程是DNA分子水平的操作,下列有关基因工程的叙述中,错误的是( )
A.限制酶只用于切割获取目的基因
B.载体与目的基因必须用同一种限制酶处理
C.基因工程所用的工具酶是限制酶DNA连接酶
D.带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测;4.作为基因的运输工具—运载体,必须具备的条件之一及理由是( )
A.能够在宿主细胞中稳定的保存下来并大量复制,以便提供大量的目的的基因
B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达
C.具有某些标记基因,以便目的基因能够与让结合
D.它的参与能够使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存
5.基因工程中常见的载体是( )
A.质体 B.染色体 C.质粒 D.线粒体;;①不能转录为信使RNA,不能
编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;二、基本步骤:
第一步:目的基因的获取
第二步:基因表达载体的构建
第三步:将目的基因导入受体细胞
第四步:目的基因的检测与鉴定;;基因工程的基本操作流程图;取出DNA;①从基因文库获取目的基因
基因组文库(一种生物的所有基因)
部分基因文库:如cDNA文库(部分基因)
②利用PCR技术扩增目的基因
原理:DNA双链复制的原理
③通过DNA合成仪直接人工合成
根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序,然后按照碱激互补配对原则,推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。;;※PCR技术扩增与DNA复制的比较;小结:三种目的基因获取方法的前提条件;第二步:基因表达载体的构建;1.用一定的_________切割
质粒,使其出现一个切
口,露出____________。
2.用_____________切断目
的基因,使其产生_____
____________。;4.过程:;启动子;第三步:将目的基因导入受体细胞;将目的基因导入植物细胞
农杆菌转化法(感染双子叶植物和裸子植物,对大多单子叶植物没有感染力)
基因枪法(常用于单子叶植物)
花粉管通道法(转基因抗虫棉)
将目的基因导入动物细胞
显微注射技术(“超级小鼠”)
将目的基因导入微生物细胞
导入大肠杆菌方法:先用Ca2+处理,使其转为感受态细胞。再将重组载体与感受态细胞混合。
;抗虫鉴定 抗病鉴定
活性鉴定等;1.运用现代生物技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中,为检测实验是否成功,最方便的方法是检测棉花植株是否有( )
A.抗虫基因 B.抗虫基因产物
C.新的细胞核 D.相应性状
2.转基因动物转基因时的受体细胞是( )
A.受精卵 B.精细胞
C.卵细胞 D.体细胞;;(2)抗病转基因植物
抗病转基因植物所用的基因:
①常用:病毒外壳蛋白基因和
病毒的复制酶基因
②抗真菌转基因植物中有:几丁质酶基因和抗毒素合成基因
(3)其它抗逆转基因植物
①抗盐碱、干旱的基因:调节细胞渗透压的基因
②抗冻蛋白基因
③抗除草剂基因
;2、改良农作物的品质;(二)动物基因工程的应用
1、用于提高动物生长速
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