4.从mRNA到蛋白质PPT.pptVIP

2) 核糖体蛋白（ribosomal protein，r-蛋白） 核糖体上有多个活性中心，每个中心都由一组核糖体蛋白构成，单个蛋白要在总体结构内才具有催化活性。 E.coli 核糖体小亚基由21种r-蛋白组成，用S1-S21表示，大亚基有36种，L1-L36。 真核细胞大亚基含有49种，小亚基33种。 3) 核糖体RNA ①5S rRNA 细菌含有120个（G-）或116个（G+）核苷酸。 两个高度保守区域： 一个含有保守序列CGAAC，是与tRNA TψC臂上的GTψCG互作的部位，是5S rRNA与tRNA相互识别的序列； 另一个含有保守序列GCGCCGAAUGGUAGU，与23S rRNA中的序列互补，是5S rRNA与大亚基互作的位点。 3) 核糖体RNA ②16S rRNA 与mRNA、大亚基和tRNA的反密码子直接作用。 存在于小亚基内，1475-1544个核苷酸构成，含有少量修饰碱基。 结构保守，3’端保守序列ACCUCCUUA，与mRNA 5’端翻译起始区富含嘌呤的序列（SD序列）互补；靠近3’端还有一段与23S rRNA互补的序列，在大小亚基的结合中起作用。 ③ 23S rRNA 含有2904个核苷酸，存在于大亚基中，有肽基转移酶的活性。 E.coli 第1984-2001存在一段能与tRNAMet互补的片段→23S rRNA可能与tRNAMet的结合有关。 靠近5’端有一段12个核苷酸的序列与5S rRNA序列互补→大亚基上 这两种RNA间可能 存在互作。 ④ 5.8S rRNA 真核生物核糖体大亚基特有的rRNA，160个核苷酸，含有修饰碱基。 含有5S rRNA中与tRNA相互识别的保守序列CGAAC →可能与原核生物5S rRNA具有相似的功能。 ⑤ 18S rRNA：存在于真核生物核糖体的小亚基中，酵母的18S rRNA由1789个核苷酸组成，3’端与E.coli 16S rRNA有同源性。 ⑥ 28S rRNA，长度3890-4500bp，功能未知。 rRNA之间以及与tRNA、mRNA之间的相互关系是建立在序列互补或同源的基础上的。 原核细胞核糖体 真核细胞核糖体 4) 核糖体有3个tRNA结合位点 A位点：新进入的氨酰-tRNA的结合位点； P位点：肽酰-tRNA的结合位点； E位点：延伸过程中的多肽链转移到氨酰-tRNA上释放tRNA的位点。 tRNA移动顺序是A位→P位→E位，通过密码子与反密码子间的互作保证反应正向进行。 4) 核糖体有3个tRNA结合位点 tRNA的氨基末端定位在大亚基上，另一端的反密码子与结合小亚基的mRNA相互识别， tRNA结合位点横跨核糖体，位于大小亚基的交界面。 4.3.2 核糖体的功能 核糖体包括多个活性中心：mRNA结合部位、A位、P位、肽基转移部位及形成肽键的部位，还有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。 小亚基负责对mRNA进行序列特异性识别，如起始部分的识别、密码子与反密码子的互作等， mRNA的结合位点也在小亚基上。 大亚基负责携带氨基酸及tRNA，包括肽键的形成，与AA-tRNA、肽酰-tRNA的结合等。 4.4 蛋白质合成的生物学机制 4.4.1 氨基酸的活化 4.4.2 翻译的起始 4.4.3 肽链的延伸 4.4.4 肽链的终止 4.4.5 蛋白质前体的加工 4.4.6 蛋白质的折叠 4.4.7 蛋白质合成的抑制剂 4.4.1 氨基酸的活化 氨基酸要在氨酰-tRNA合成酶的作用下与tRNA结合，生成活化氨基酸—AA-tRNA，才能被运到核糖体中，参与肽链的起始和延伸。 至少存在20种以上具有氨基酸专一性的氨酰-tRNA合成酶，能够识别并通过氨基酸的羧基与tRNA 3’端腺苷酸核糖基上的3’-OH缩水形成二酯键。 4.4.2 翻译的起始 细菌中，起始氨基酸是fMet，与核糖体小亚基结合的是N-fMet-tRNAfMet；真核生物中，起始氨基酸是Met，Met-tRNAiMet与小亚基结合起始肽链合成，普通tRNAMet只能进行肽链延伸。 在模板mRNA编码区5’形成核糖体-mRNA-起始tRNA复合物，将起始氨基酸放入P位点。 3个步骤： ①小亚基先与IF-1、IF-3结合，通过SD序列与模板mRNA结合； ②在IF-2和GTP帮助下，fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，反密码子与起始密码子配对； ③带有tRNA、mRNA和翻译起始因子的小亚基复合物与大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 1) 原核生物翻译的起始 7种成分：①小亚基；②mRNA ；③fMet-tRNAfMet；④翻译起始因子IF-1、IF-2和IF-3；⑤GTP；⑥大亚基