DNA复制转录翻译PPT.pptVIP

3 HO 5 3? 5? 3? 5? 引物酶催化合成短链RNA引物分子 引物 引物酶 4、DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 ( DNA-dependent DNA polymerase, DDDP ) 简称：DNA-pol 活性：1. 5??3? 的聚合酶活性 2. 核酸外切酶活性 DNA连接酶(DNA ligase)可催化两段DNA片段之间磷酸二酯键的形成，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。 5、DNA连接酶 DNA连接酶 ATP（NAD+） ADP+Pi（NMN++AMP） HO 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ DNA连接酶的连接作用 DNA复制过程简图 DNA连接酶在复制中起最后接合缺口的作用。 在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。 是基因工程的重要工具酶之一。 DNA连接酶的作用 解螺旋酶(helicase) ，又称解链酶或rep蛋白，是用于解开DNA双链的酶蛋白。 每解开一对碱基，需消耗2分子ATP。 6、解螺旋酶 单链DNA结合蛋白（single strand binding protein, SSB），又称螺旋反稳蛋白(HDP)，是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。 7、单链DNA结合蛋白 SSB的生理作用 使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存在，即稳定单链DNA，便于其作为模板复制子代DNA； 保护单链DNA，避免核酸酶的降解。 8、DNA拓扑异构酶 人类拓扑异构酶Ⅰ的分子结构 能够松解DNA超螺旋结构的酶。 10 8 局部解链后 DNA复制过程中正超螺旋的形成 解链过程中正超螺旋的形成 拓扑异构酶的作用特点 既能水解 、又能连接磷酸二酯键 拓扑异构酶Ⅰ 拓扑异构酶Ⅱ 分 类 拓扑异构酶Ⅰ 切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。 反应不需ATP。 拓扑异构酶Ⅱ 切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。 利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。 DNA拓扑异构酶的作用机制 1、复制的起始 （三） DNA生物合成过程 解旋解链，形成复制叉 引发体组装和引物合成 2、复制的延长 DNA聚合酶 5 3 5 dATP dGTP dTTP dCTP dTTP dGTP dATP dCTP OH 3 3 DNA-pol DNA复制的延长过程 3、复制的终止 去除引物，填补缺口 连接冈崎片段 端粒（telomere）是指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构部分，通常膨大成粒状。 （四）真核生物端粒 功能 ? 维持染色体的稳定性 ? 保证DNA复制的完整性 端粒的结构特点 ? 由末端单链DNA序列和蛋白质构成。 ? 末端DNA序列是多次重复的富含G、T碱基的短 序列。 TTTTGGGGTTTTGGGG… 线性DNA在复制完成后，其末端由于引物RNA的水解而可能出现缩短。故需要在端粒酶（telomerase）的催化下，进行延长反应。 5? 3? 3? 5? 5? 3? 3? 5? 端粒酶(telomerase) 端粒酶是一种RNA-蛋白质复合体，它可以其RNA为模板，通过逆转录过程对末端DNA链进行延长。 端粒酶的分子结构 端粒酶的爬行模型（动画演示） （五） 逆转录 1、逆转录病毒和逆转录酶 逆转录病毒细胞内的逆转录现象： RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA 2、逆转录研究的意义 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现。 逆转录现象说明：至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论。 （一）RNA的转录过程：（略） 转录起始 链的延伸 转录终止 二、基因的转录与加工 （二）RNA的转录后加工 在细胞内，由RNA聚合酶合成的原初转录物（primary transcript）往往需要一系列的变化，才转变为成熟的RNA分子。此过程总称为RNA的成熟或称为RNA的转录后加工。 1、mRNA前体的加工： 原核生物的mRNA转录后一般不需要加工，转录的同时即进行翻译（半寿期短）。亦有少数多顺反子的mRNA需要核酸酶切成小单位，然后再翻译。 真核生物mRNA（半寿期较长）转录物很大，在加工过程中形成许多分子大小不等的中间物，它们被称为核内不均一RNA（heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)，需要进一步进行加工修饰转化为mRNA。加工包括： （1）hnRNA被剪接，把内含子（DNA上非编码序列）转录序列剪掉，把外显子