g蛋白质的生物合成PPT.ppt

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HSP70家族促进蛋白质折叠的基本作用—— 结合保护待折叠多肽片段,再释放该片段进行折叠。形成HSP70和多肽片段依次结合、解离的循环。 HSP40结合待折叠多肽片段 HSP70-ATP复合物 HSP40- HSP70-ADP-多肽复合物 ATP水解 GrpE ATP ADP 复合物解离,释出多肽链片段进行正确折叠 (2) 伴侣蛋白(chaperonin) 伴侣蛋白是分子伴侣的另一家族,如大肠杆菌的Gro EL和Gro ES(真核细胞中同源物为HSP60和HSP10)等家族。 其主要作用是为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成天然空间构象的微环境。 进位需要延长因子EF-Tu与EF-Ts参与。 Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GDP 进位的反应过程: 2.成肽 成肽是在转肽酶(peptidase)的催化下,核蛋白体P位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的α-氨基结合形成肽键的过程。 成肽的反应过程 3. 转位 转位是在转位酶的催化下,核蛋白体向mRNA的3′-端移动一个密码子的距离,使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。 转位需要延长因子EF-G参与。 EF-G有转位酶(translocase)活性,可结合并水解1分子GTP,释放的能量促进核蛋白体向mRNA的3′侧移动,使起始二肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核蛋白体P位,而卸载的tRNA则移入E位。 转位 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 成肽→转位→下一轮进位 进位 转位 成肽 肽链合成延长(核蛋白体循环)过程 (三)终止 指核蛋白体A位出现mRNA的终止密码子后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核蛋白体大、小亚基等分离的过程。 终止阶段需要释放因子RF-1、 RF-2和 RF-3参与。 RF-3可结合核蛋白体其他部位,有GTP酶活性,能介导RF-1、RF-2与核蛋白体的相互作用。 释放因子的功能: 识别终止密码子 RF-1特异识别UAA、UAG; RF-2特异识别UAA、UGA。 诱导转肽酶转变为酯酶活性 催化新生肽链与结合在P位的tRNA之间的酯键水解,使肽链从核蛋白体上释放。 原核肽链合成终止过程 U A G 5 3 RF COO- 二、真核生物的肽链合成过程 (一)起始 1. 核蛋白体大小亚基分离; 2. 起始氨基酰-tRNA的结合; 3. mRNA在小亚基定位结合; 4. 核蛋白体大亚基结合。 IF与eIF在形成起始复合物中的作用比较: 大小亚基分离 IF eIF 步骤 IF3(IF1) eIF3 mRNA的就位 核酸之间及与蛋白质的辨认结合 eIF3,eIF1 eIF4A , eIF4B CBP-1,CBP-2 起始tRNA就位 IF2, GTP(IF1) eIF2 , eIF3 , eIF4B 大小亚基结合 IF脱落及 GTP水解 eIF脱落,eIF5 , GTP水解 27/56 Met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP 真核生物翻译起始复合物形成过程 真核生物肽链合成的延长过程与原核生物基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。 另外,真核细胞核蛋白体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 (二)延长 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位,结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EFG 有转位酶活性,促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位,促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 (三)终止 真核生物翻译终止过程与原核生物相似,但只有1个释放因子eRF,可识别所有终止密码子,完成原核生物各类RF的功能。 原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别 原核生物 真核生物 mRNA 一条mRNA编码几种蛋白质(多顺反子) 一条mRNA编码一种蛋白质(单顺反子) 转录后很少加工 转录后进行首尾修饰及剪接 转录、翻译和mRNA的降解可同时发生 mRNA在核内合成,加工后进入胞液,再作为模板指导翻译 核蛋白体 30S小亚基+50S大亚基 ? 70S核蛋白体 40S小亚基+60S大亚基 ?

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