人教版选修3专题2第二节第二课时动物细胞培养和核移植技术(共32张PPT)PPT.pptVIP

2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 河北任丘二中 王小燕  植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养 植物体细胞杂交 原生质体 番茄细胞 原生质体融合 再生出细胞壁 杂种细胞 脱分化 愈伤组织 杂种植株 再分化 植物体细胞杂交技术（重点） 马铃薯细胞 标志：成功融合 人工诱导 去壁 植物组织培养 植物细胞的融合 动物细胞培养技术 问题探讨 怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 动物细胞培养的过程及条件 动物体细胞核移植技术过程 学习新课 2、过程 幼龄动物 剪碎组织 取动物器官 和组织 细胞悬液 胰蛋白酶处理 单个细胞 胰蛋白酶处理 单个细胞 细胞贴壁 一、动物细胞培养 原代 细胞培养 细胞培养 传代 细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。 一、动物细胞培养 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞（10代以后）从培养瓶中取出，配制成细胞悬液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 遗传物质改变 具癌细胞特点 遗传物质未改变 2、过程 取 的组织、器官 细胞悬液 酶 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 原代培养 1-10代细胞 40—50代细胞 传代培养 胰蛋白酶 特点 细胞贴壁 细胞接触抑制 50代以后 失去接触抑制 接触抑制 动物细胞生长特性 部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。 培养器皿 3、条件： 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境： 补充合成培养基中缺乏的物质 一动物细胞培养 （抗生素、定期更换培养液） 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 O2：进行 呼吸 CO2：维持培养液的PH值（95%空气和5% CO2 ） （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆） 有氧 （1）蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）自身皮肤细胞 （3）检测有毒物质 （4）生理、病理、药理等方面的研究。 4、应用 一动物细胞培养 问题 我们能否利用类似植物组织培养获得完整植物体的方法培养动物细胞，使其发育成一个完整的个体？ 不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性，而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。 全能性高低： 植物细胞＞动物细胞 能不能用高产奶牛的一个体细胞，培育出一头高产奶牛呢？ 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 利用动物体细胞核移植技术 二、动物细胞核移植技术 将动物的一个细胞的细胞核，移入到一个已经 中，使其重组并发育成一个新的胚胎，该胚胎最终发育成完整的动物个体。 去掉细胞核的卵母细胞 克隆动物 类型 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 细胞分化程度低，恢复全能性 容易 。 细胞分化程度高，恢复全能性 困难 。 容易 困难 二、动物细胞核移植技术 胚胎移植 细胞核移植 体细胞核移植的过程（高产奶牛） 体细胞 培养 取出核 甲牛 乙牛 MⅡ卵母细胞 去除核 去核卵母细胞 重组 卵细胞 核植入 卵裂 早期胚胎 代孕母牛丙 移植 体细胞群 克隆牛 细胞核移植 胚胎移植 物理或化学方法激活 显微操作法 无性生殖 问题 利用体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 克隆动物DNA主要来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。所以用体细胞核移植方法克隆的动物并不是供核动物完全相同的复制。 卵细胞 C母绵羊子宫 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多莉羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 妊娠 多莉羊的培育过程 细胞贴壁：指培养过程中，细胞贴附在瓶壁上的现象。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒。 * 3、特点 细胞贴壁 原代培养的细胞一般传至1